hTERT-HPNE（人胰腺导管细胞）

细胞物理特性的检测方法

这类方法利用细胞的物理属性（如大小、密度、电荷等）进行分离和检测。
显微镜直接计数法：利用血球计数板在显微镜下直接计数，操作简单，但耗时且需要经验。
细胞自动计数仪：通过图像分析或库尔特原理进行自动计数，提高了效率和准确性。
流式细胞术 (Flow Cytometry, FCM)：将细胞悬液加压通过激光束，通过检测细胞的散射光（反映大小和颗粒度）和荧光信号（标记的抗体）对单个细胞进行高速、多参数分析和分选。
商品介绍

 产品名称：hTERT-HPNE（人胰腺导管细胞）
英文名称：hTERT-HPNE
细胞别称；hTERT-HPNE；人胰腺导管上皮细胞
种属来源；人
组织来源；胰腺
生长特性；贴壁生长
细胞形态；上皮细胞样
细胞代数；10代以内
背景介绍；hTERT- hpne细胞系是通过逆转录病毒表达载体(逆转录病毒表达载体pBABEpuro)转导人胰管产生的，该载体含有hTERT基因。受感染的细胞端粒酶呈阳性，但未衰老，在Ref的文献中传代150多次后仍在增殖。
细胞规格；1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测；无
培养基；70.5%DMEM（无糖）+23.5% Medium M3+5%FBS+10ng/ml重组人表皮生长因子EGF+750ng/ml嘌呤霉素+2.5g/L  D-葡萄糖+PS
培养条件；气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃
冻存条件；无血清冻存液，液氮储存
不同类型细胞的特异性（生物特性差异）

形态多样性：细胞形态因功能而异，如成纤维细胞呈梭形或多角形，神经细胞有突起，上皮细胞呈多边形紧密排列；细菌细胞多为球形、杆状或螺旋形。
功能特异性：动物细胞依赖线粒体供能，植物细胞具叶绿体进行光合作用；原核细胞（如细菌）无细胞核，真核细胞（如动植物细胞）有核膜包裹的核；某些细胞如酵母细胞可进行出芽生殖，哺乳动物细胞则通过有丝分裂增殖。
生长特性：贴壁细胞需附着表面生长（如成纤维细胞），悬浮细胞可在培养液中自由生长（如血液细胞）；不同细胞分裂速度各异，如肿瘤细胞增殖较快，正常体细胞分裂较慢。
细胞复苏步骤：
准备工作‌
提前预热完全培养基至37℃；
准备37℃水浴锅，打开超净台紫外灭菌15分钟，通风5分钟后开始操作。
‌快速解冻‌
从液氮中取出冻存管，迅速放入37℃水浴中，‌轻轻摇动‌，使细胞在‌1分钟内快速融化‌，避免冰晶损伤细胞。
‌转移与离心‌
在超净台内用75%酒精擦拭冻存管外壁消毒；
将细胞悬液转移至含5–6 mL预热完全培养基的15 mL离心管中，轻轻混匀；
‌1000 rpm离心5分钟‌，弃上清，防止细胞死亡。
‌重悬与接种‌
加入4–6 mL新鲜完全培养基重悬细胞，吹打均匀；
接种至T25培养瓶或6 cm培养皿中，放入37℃、5% CO₂培养箱中静置培养过夜。
‌次日换液‌
第二天更换新鲜培养基，去除未贴壁的死亡细胞，观察细胞贴壁与生长状态。
细胞冻存步骤：
冻存液配制‌
使用90%完全培养基 + 10% DMSO，或95% FBS + 5% DMSO，现配现用。
‌细胞处理‌
按传代方法收集细胞，1000 rpm离心5分钟；
弃上清，用适量冻存液重悬，调整细胞密度为5×10⁵至1×10⁶ cells/mL。
‌程序降温‌
将细胞分装至冻存管中，使用程序降温盒以‌-1℃/min速率降温‌，过夜后转移至液氮中长期保存；
若无降温盒，可将冻存管置于-80℃冰箱过夜，次日转入液氮（非最优，但可接受）。

• 细菌污染： 培养基变浑浊、pH值下降（变黄），镜下可见大量快速移动的小颗粒。
• 真菌/酵母污染： 培养基中出现絮状、丝状团块，镜下可见酵母样出芽细胞或菌丝。
• 支原体污染： 培养基外观通常无明显变化，但细胞生长状态会变差，需通过专门试剂盒检测。