细胞物理特性的检测方法
这类方法利用细胞的物理属性(如大小、密度、电荷等)进行分离和检测。
显微镜直接计数法:利用血球计数板在显微镜下直接计数,操作简单,但耗时且需要经验。
细胞自动计数仪:通过图像分析或库尔特原理进行自动计数,提高了效率和准确性。
流式细胞术 (Flow Cytometry, FCM):将细胞悬液加压通过激光束,通过检测细胞的散射光(反映大小和颗粒度)和荧光信号(标记的抗体)对单个细胞进行高速、多参数分析和分选。
| 产品名称 |
HEK-293A人胚肾细胞 |
种属 |
人 |
| 英文名 |
HEK-293A |
规格 |
1 × 10⁶ cells/T25 |
| 货号 |
LZ-01X967 |
组织来源 |
肾 |
商品介绍
产品名称:HEK-293A人胚肾细胞
英文名称:HEK-293A
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 上皮细胞样
冻存条件
冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度:液氮
培养方案A(默认)
生长培养基:
MEM(ATCC改良)+10% FBS+1% P/S
培养条件:
气相:空气,95%;CO2,5%, 温度:37℃
推荐传代比例 1:3-1:4
推荐换液频率 2-3次/周
注意事项 该细胞贴壁松散,操作时请尽量轻柔;换液时需预热培养基;收货如有大块脱落的细胞团,为正常现象,请按照收货注意事项处理。
参考资料(来源文献)
背景描述 293 [HEK-293]细胞是剪切过的人腺病毒5(Ad5)转染的人胚肾细胞形成的永生化细胞,293 [HEK-293]细胞包含并表达转染的Ad5基因。早期报道中指出,293 [HEK-293]细胞基因组中含有腺病毒5(Ad5)基因组的左侧端和右侧端的DNA,但是现在明确了只存在其左侧端的DNA。经过对Ad5的插入点的克隆测序发现,Ad5的1-4344位线性核苷酸整合入293 [HEK-293]细胞19号染色体(19q13.2)。293 [HEK-293]细胞为人类腺病毒载体扩增的宿主,可表达异常的玻连蛋白的细胞表面受体,由整合素β1亚单位和玻连蛋白受体α-v亚单位组成。
年龄(性别) 胎儿
组织来源 肾;以腺病毒5DNA进行转化
细胞类型 转化细胞系
生物等级 BSL-2
倍增时间 ~24-30 hours
致瘤性 Yes, forms tumors in nude mice.
受体表达情况 vitronectin
保藏机构 ATCC; CRL-1573 ATCC: PTA-4488 DSMZ: ACC-305 ECACC: 85120602
不同类型细胞的特异性(生物特性差异)
形态多样性:细胞形态因功能而异,如成纤维细胞呈梭形或多角形,神经细胞有突起,上皮细胞呈多边形紧密排列;细菌细胞多为球形、杆状或螺旋形。
功能特异性:动物细胞依赖线粒体供能,植物细胞具叶绿体进行光合作用;原核细胞(如细菌)无细胞核,真核细胞(如动植物细胞)有核膜包裹的核;某些细胞如酵母细胞可进行出芽生殖,哺乳动物细胞则通过有丝分裂增殖。
生长特性:贴壁细胞需附着表面生长(如成纤维细胞),悬浮细胞可在培养液中自由生长(如血液细胞);不同细胞分裂速度各异,如肿瘤细胞增殖较快,正常体细胞分裂较慢。
细胞培养的营养供给
培养基是细胞的“食物”,需要提供全面均衡的营养。
基础培养基: 如DMEM、RPMI-1640等,提供氨基酸、维生素、无机盐、葡萄糖等基本营养物质。
血清: 通常添加10%-20%的胎牛血清,以提供细胞生长所必需的生长因子、激素和贴壁因子。根据需求也可使用低血清的维持培养液。
其他添加物:
谷氨酰胺: 细胞生长的重要氮源,因在溶液中不稳定,需在使用前添加。
抗生素: 如青霉素-链霉素,可预防细菌污染。
细胞因子: 针对特定细胞(如免疫细胞),需添加特定的细胞因子(如白细胞介素-2)来促进其增殖和功能激活。
💧 湿度
培养箱湿度: 通常保持在 95% 以上。
目的: 防止培养基蒸发过快,从而维持培养体系的稳定体积和渗透压。
公司正在出售的产品:
| 组织氯乙酰基转移酶(CAT)报告基因活性荧光定量检测试剂盒 |
内皮素-1单克隆抗体 |
| IGF 蛋白免疫共沉淀分析试剂盒 |
环指蛋白32抗体 |
| 冰冻切片组织PARP蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 |
p40蛋白抗体 |
| 活体内蛋白质交联免疫共沉淀检测试剂盒 |
富含亮氨酸胞浆蛋白CBY1抗体 |
| 细胞胱硫醚-γ-合成酶(cystathionine γ-synthase;CGS)活性比色法定量检测试剂盒 |
中心体蛋白104抗体 |
| 组织SPHK1激酶活性荧光定量检测试剂盒 |
嗅球蛋白2抗体 |
| 转基因油菜(canola)RF3品系基因检测试剂盒 |
3-氨基-2-恶唑烷酮单克隆抗体 |
| 线虫M9缓冲液 |
柯萨奇病毒蛋白受体B抗体 |
| 植物葡萄糖磷酸变位酶(phosphoglucomutase;PGM) |
SUSD4蛋白抗体 |
| 血液磷酸二酯酶(PDE)总活性荧光定量检测试剂盒 |
HEK-293A人胚肾细胞G蛋白偶合受体激酶1抗体 |
| 血液超氧化物阴离子比色法定量检测试剂盒 |
丝氨酸蛋白酶45抗体 |
| 咖啡三氯蔗糖(sucralose)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒 |
DNA甲基转移酶1抗体 |
注意事项:
接收后处理:
收到细胞后静置 2–4 小时,使细胞恢复状态;
前 3 天每日拍照记录细胞形态与贴壁情况,便于问题追溯;
运输用灌液培养基不可继续使用,需更换为新配制的完全培养基。
污染防控:
定期用 75% 酒精擦拭培养箱内壁;
使用紫外灯照射培养箱内部至少 30 分钟;
水槽使用高压灭菌水或含铜离子溶液抑制微生物生长。
细胞活性检测:
收到后 7 天内可用台盼蓝染色法检测活力,低于 80% 可申请重发。
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