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| 销售商： 上海联祖生物科技有限公司 | 查看该公司所有产品 >> |
培养操作要点
基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。
培养条件设置：
温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。
pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。
CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。
渗透压：控制在260-328mOsm/kg为宜。
商品介绍
| 产品名称 | COLO205人结肠癌细胞 | 货号 | LZ-01X1067 |
| 英文名 | COLO205 | 规格 | 1 × 10⁶ cells/T25 |
产品名称：COLO205人结肠癌细胞
英文名称：COLO205
细胞别称：Colo 205; CoLo 205; COLO-205; Colo-205; COLO.205; Colo205; COLO205; Co 205；人结肠癌细胞
种属来源：人
年龄性别：男；70岁
组织来源：结直肠腺癌，腹水转移
生长特性：半贴半悬生长
细胞形态：上皮细胞样
背景简介：COLO 205细胞细胞系1957年由T.U.Sample等从患有结肠癌的70岁男性白人的腹水分离。 该病人在取腹水样品前已用5-氟尿嘧啶4-6周。角蛋白过氧化物酶染色阳性。
生物等级：1
细胞规格：1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测：无
基因表达情况：carcinoembryonic antigen (CEA) 1.5 to 4.1 ng/10^6 cells cells/10 days; keratin; interleukin 10 (IL-10, interleukin-10), The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining.
保藏机构：ATCC; CCL-222 BCRC; 60054 ECACC; 87061208
培养基：80% RPMI-1640+20% FBS
培养条件：气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃
冻存条件：无血清冻存液，液氮储存
倍增时间：~25-30 hours
细胞活性检测
这类方法主要用于评估细胞的增殖能力、代谢活性或杀伤功能等。
细胞增殖检测：
DNA合成标记法：如BrdU法，通过检测细胞在增殖时掺入DNA的胸腺嘧啶类似物来反映增殖活性。
代谢活性检测法：如MTT法、CCK-8法，通过检测活细胞线粒体的代谢活性，间接反映活细胞数量。
细胞毒性/杀伤检测：
乳酸脱氢酶 (LDH) 释放法：细胞膜受损后，细胞内的LDH会释放到培养基中，通过检测上清液中LDH的活性来评估细胞毒性。
59Cr释放法：用放射性同位素标记靶细胞，当效应细胞（如NK细胞）杀伤靶细胞后，放射性物质释放，通过测定其放射活性来计算杀伤率。
细胞复苏步骤：
准备工作
提前预热完全培养基至37℃；
准备37℃水浴锅，打开超净台紫外灭菌15分钟，通风5分钟后开始操作。
快速解冻
从液氮中取出冻存管，迅速放入37℃水浴中，轻轻摇动，使细胞在1分钟内快速融化，避免冰晶损伤细胞。
转移与离心
在超净台内用75%酒精擦拭冻存管外壁消毒；
将细胞悬液转移至含5–6 mL预热完全培养基的15 mL离心管中，轻轻混匀；
1000 rpm离心5分钟，弃上清，防止细胞死亡。
重悬与接种
加入4–6 mL新鲜完全培养基重悬细胞，吹打均匀；
接种至T25培养瓶或6 cm培养皿中，放入37℃、5% CO₂培养箱中静置培养过夜。
次日换液
第二天更换新鲜培养基，去除未贴壁的死亡细胞，观察细胞贴壁与生长状态。
细胞冻存步骤：
冻存液配制
使用90%完全培养基 + 10% DMSO，或95% FBS + 5% DMSO，现配现用。
细胞处理
按传代方法收集细胞，1000 rpm离心5分钟；
弃上清，用适量冻存液重悬，调整细胞密度为5×10⁵至1×10⁶ cells/mL。
程序降温
将细胞分装至冻存管中，使用程序降温盒以-1℃/min速率降温，过夜后转移至液氮中长期保存；
若无降温盒，可将冻存管置于-80℃冰箱过夜，次日转入液氮（非最优，但可接受）。
| HRP底物TMB缓冲溶液 | AF680标记的上皮钙粘附分子抗体 |
| 载玻片细胞AKT蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 | 己糖激酶1抗体 |
| 细胞EGFR 蛋白表达荧光定量检测试剂盒 | PE标记小鼠CD106单克隆抗体 |
| 糖果甘素（dulcin）含量高效液相色谱法定量检测试剂盒 | 干扰素诱导的三角形四肽重复蛋白3抗体 |
| 冰冻切片溶酶体脂酶（酸性脂酶）活性染色试剂盒 | 转录下调蛋白1抗体 |
| 组织碱性磷酸酶活性比色法定量检测试剂盒 | 遗传性脉络膜缺乏症相关蛋白样抗体 |
| 燕麦β-葡聚糖含量酶连续反应比色法定量检测试剂盒 | AF647标记人CD11c单克隆抗体 |
| PH2-3显色（CRESOL RED）指示溶液 | 磷酸甘露糖变位酶2抗体 |
| 体液科萨基病毒A（Coxsackievirus A）定量PCR扩增检测试剂盒 | α2C-AR肾上腺素能受体抗体 |
| 组织AURORA-A激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C） | COLO205人结肠癌细胞IQCJ抗体 |
| CD56-PE | 通用转录因子IIF亚基2/TFIIF RAP 30抗体 |
| 细胞甲基化组蛋白H3-K9染色质免疫沉淀分析（CHIP）试剂盒 | FAM129B蛋白抗体 |
- 细菌污染： 培养基变浑浊、pH值下降（变黄），镜下可见大量快速移动的小颗粒。
- 真菌/酵母污染： 培养基中出现絮状、丝状团块，镜下可见酵母样出芽细胞或菌丝。
- 支原体污染： 培养基外观通常无明显变化，但细胞生长状态会变差，需通过专门试剂盒检测。
