细胞活性检测
这类方法主要用于评估细胞的增殖能力、代谢活性或杀伤功能等。
细胞增殖检测:
DNA合成标记法:如BrdU法,通过检测细胞在增殖时掺入DNA的胸腺嘧啶类似物来反映增殖活性。
代谢活性检测法:如MTT法、CCK-8法,通过检测活细胞线粒体的代谢活性,间接反映活细胞数量。
细胞毒性/杀伤检测:
乳酸脱氢酶 (LDH) 释放法:细胞膜受损后,细胞内的LDH会释放到培养基中,通过检测上清液中LDH的活性来评估细胞毒性。
58Cr释放法:用放射性同位素标记靶细胞,当效应细胞(如NK细胞)杀伤靶细胞后,放射性物质释放,通过测定其放射活性来计算杀伤率。
商品介绍
| 产品名称 |
COLO 679人黑素瘤细胞 |
种属 |
人 |
| 英文名 |
COLO 679 |
规格 |
1 × 10⁶ cells/T25 |
| 货号 |
LZ-X8718 |
组织来源 |
皮肤 |
产品名称:COLO 679人黑素瘤细胞
英文名称:COLO 679
种属来源: 人
年龄性别: 47 岁,女性
组织来源: 皮肤
生长特性: 贴壁生长
细胞形态: 上皮细胞样
细胞规格: 1 X 10 6cells/T25 或 1 mL 冻存管
培养条件: RPMI 1640+10% Foetal Bovine Serum37 ℃, 5% CO2
冻存条件: 90% FBS + 10% DMSO
传代方法:1:3 传代, 2-3 天传 1 代
细胞类型与特性
原代细胞:直接从组织中分离的细胞,通常指第1-10代细胞,具有接近体内状态的特性。
细胞系:原代细胞首次传代成功后形成的细胞群,可连续传代。
细胞株:从原代培养或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞,通常为第10-57代。
根据生长方式分为:
贴壁细胞:需附着在培养瓶表面生长,如成纤维细胞、上皮细胞。
悬浮细胞:在培养基中自由悬浮生长,如血液细胞。
半贴壁半悬浮细胞:兼具贴壁和悬浮生长特性。
细胞培养的营养供给
培养基是细胞的“食物”,需要提供全面均衡的营养。
基础培养基: 如DMEM、RPMI-1640等,提供氨基酸、维生素、无机盐、葡萄糖等基本营养物质。
血清: 通常添加10%-20%的胎牛血清,以提供细胞生长所必需的生长因子、激素和贴壁因子。根据需求也可使用低血清的维持培养液。
其他添加物:
谷氨酰胺: 细胞生长的重要氮源,因在溶液中不稳定,需在使用前添加。
抗生素: 如青霉素-链霉素,可预防细菌污染。
细胞因子: 针对特定细胞(如免疫细胞),需添加特定的细胞因子(如白细胞介素-2)来促进其增殖和功能激活。
💧 湿度
培养箱湿度: 通常保持在 95% 以上。
目的: 防止培养基蒸发过快,从而维持培养体系的稳定体积和渗透压。
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注意事项:
接收后处理:
收到细胞后静置 2–4 小时,使细胞恢复状态;
前 3 天每日拍照记录细胞形态与贴壁情况,便于问题追溯;
运输用灌液培养基不可继续使用,需更换为新配制的完全培养基。
污染防控:
定期用 75% 酒精擦拭培养箱内壁;
使用紫外灯照射培养箱内部至少 30 分钟;
水槽使用高压灭菌水或含铜离子溶液抑制微生物生长。
细胞活性检测:
收到后 7 天内可用台盼蓝染色法检测活力,低于 80% 可申请重发。
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