培养操作要点
基础培养基选择:分为天然培养基、合成培养基(如DMEM、RPMI 1640)和无血清培养基。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。
培养条件设置:
温度:多数人和哺乳动物细胞为36-37℃,昆虫细胞为27℃。
pH值:多数哺乳动物细胞为7.4,昆虫细胞为6.2。
CO₂浓度:通常维持5-7% CO₂,多数细胞适合5% CO₂气氛。
渗透压:控制在260-322mOsm/kg为宜。
| 产品名称 |
A673人横纹肌瘤细胞 |
种属 |
人 |
| 英文名 |
A673 |
规格 |
1 × 10⁶ cells/T25 |
| 货号 |
LZ-01X1133 |
组织来源 |
肌肉;横纹肌肉瘤 |
商品介绍
产品名称:A673人横纹肌瘤细胞
英文名称:A673
细胞别称:A673; RMS 1598; RMS1598;人横纹肌瘤细胞
种属来源:人
年龄性别:女;15岁
组织来源:肌肉;横纹肌肉瘤
生长特性:贴壁生长
细胞形态:多边形细胞样
背景简介:A-673是源自15岁女性的横纹肌肉瘤。 它在软琼脂上形成克隆,在抑制血清处理的小鼠中成瘤。有四个以上的标志染色体,一个额外的F染色体和两个异常的B染色体。
生物等级:1
细胞规格:1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测:无
基因表达情况:
保藏机构:ATCC; CRL-1598 ATCC; CRL-7910 ECACC; 85111504
培养基:90%MEM+10% FBS+1%PS
培养条件:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
冻存条件:无血清冻存液,液氮储存
倍增时间:~28 hours
细胞活性检测
这类方法主要用于评估细胞的增殖能力、代谢活性或杀伤功能等。
细胞增殖检测:
DNA合成标记法:如BrdU法,通过检测细胞在增殖时掺入DNA的胸腺嘧啶类似物来反映增殖活性。
代谢活性检测法:如MTT法、CCK-8法,通过检测活细胞线粒体的代谢活性,间接反映活细胞数量。
细胞毒性/杀伤检测:
乳酸脱氢酶 (LDH) 释放法:细胞膜受损后,细胞内的LDH会释放到培养基中,通过检测上清液中LDH的活性来评估细胞毒性。
53Cr释放法:用放射性同位素标记靶细胞,当效应细胞(如NK细胞)杀伤靶细胞后,放射性物质释放,通过测定其放射活性来计算杀伤率。
细胞培养的营养供给
培养基是细胞的“食物”,需要提供全面均衡的营养。
基础培养基: 如DMEM、RPMI-1640等,提供氨基酸、维生素、无机盐、葡萄糖等基本营养物质。
血清: 通常添加10%-20%的胎牛血清,以提供细胞生长所必需的生长因子、激素和贴壁因子。根据需求也可使用低血清的维持培养液。
其他添加物:
谷氨酰胺: 细胞生长的重要氮源,因在溶液中不稳定,需在使用前添加。
抗生素: 如青霉素-链霉素,可预防细菌污染。
细胞因子: 针对特定细胞(如免疫细胞),需添加特定的细胞因子(如白细胞介素-2)来促进其增殖和功能激活。
💧 湿度
培养箱湿度: 通常保持在 95% 以上。
目的: 防止培养基蒸发过快,从而维持培养体系的稳定体积和渗透压。
公司正在出售的产品:
| 细胞D-葡萄糖氧化法定量检测试剂盒 |
SARS冠状病毒2 Spike蛋白中和抗体 |
| DRP-1蛋白表达检测试剂盒 |
间隙连接蛋白45抗体 |
| MAPK蛋白表达西方杂交分析试剂盒 |
Ras-GTP酶激活蛋白3抗体 |
| 体液糖胺多糖(GAG)总含量二甲基亚甲基蓝(DMMB)比色法定量检测试剂盒 |
骨骼肌慢肌肌钙蛋白T抗体 |
| 原位染色试剂盒 |
自噬相关基因AMBRA1抗体 |
| 组织亚硝酸盐含量比色法定量检测试剂盒 |
原癌基因CD39样蛋白4/ENTPD5抗体 |
| 体外非细胞系统细胞色素P450亚酶CYP1A1(EROD)活性 |
APS抗体 |
| 组织磷脂酶D2(Phospholipase D2)活性荧光定量检测试剂盒 |
磷酸化胞浆型磷脂酶A2抗体 |
| 植物线粒体形态染色试剂盒 |
癌症亮氨酸拉链下调因子1抗体 |
| 细胞逆转录酶(REVERSE TRANSCREPTASE)活性荧光定量 |
A673人横纹肌瘤细胞KRBA1蛋白抗体 |
| 虫卵细胞活力和死亡细胞流式定量检测试剂盒 |
唾液酸酶3抗体 |
| 树脂法唾液DNA萃取试剂盒 |
Fcγ免疫球蛋白IgG结合蛋白抗体 |
注意事项:
接收后处理:
收到细胞后静置 2–4 小时,使细胞恢复状态;
前 3 天每日拍照记录细胞形态与贴壁情况,便于问题追溯;
运输用灌液培养基不可继续使用,需更换为新配制的完全培养基。
污染防控:
定期用 75% 酒精擦拭培养箱内壁;
使用紫外灯照射培养箱内部至少 30 分钟;
水槽使用高压灭菌水或含铜离子溶液抑制微生物生长。
细胞活性检测:
收到后 7 天内可用台盼蓝染色法检测活力,低于 80% 可申请重发。
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