细胞物理特性的检测方法
这类方法利用细胞的物理属性(如大小、密度、电荷等)进行分离和检测。
显微镜直接计数法:利用血球计数板在显微镜下直接计数,操作简单,但耗时且需要经验。
细胞自动计数仪:通过图像分析或库尔特原理进行自动计数,提高了效率和准确性。
流式细胞术 (Flow Cytometry, FCM):将细胞悬液加压通过激光束,通过检测细胞的散射光(反映大小和颗粒度)和荧光信号(标记的抗体)对单个细胞进行高速、多参数分析和分选。
商品介绍
| 产品名称 |
59M人卵巢癌细胞 |
种属 |
人 |
| 英文名 |
59M |
规格 |
1 × 10⁶ cells/T25 |
| 货号 |
LZ-X8635 |
组织来源 |
卵巢 |
产品名称:59M人卵巢癌细胞
英文名称:59M
种属来源: 人
性别年龄: 女性
组织来源: 卵巢
生长特性: 贴壁生长
细胞形态: 上皮细胞样
细胞规格: 1 X 10 6cells/T25 或 1 mL 冻存管
培养条件: DMEM + 2mM Glutamine + 1mM Sodium Pyruvate (NaP) + 20 IU/l Bovine Insulin + 10% Foetal Bovine37 ℃, 5% CO2
冻存条件: 90% FBS + 10% DMSO
传代方法:1:3 传代, 2-3 天传 1 代
不同类型细胞的特异性(生物特性差异)
形态多样性:细胞形态因功能而异,如成纤维细胞呈梭形或多角形,神经细胞有突起,上皮细胞呈多边形紧密排列;细菌细胞多为球形、杆状或螺旋形。
功能特异性:动物细胞依赖线粒体供能,植物细胞具叶绿体进行光合作用;原核细胞(如细菌)无细胞核,真核细胞(如动植物细胞)有核膜包裹的核;某些细胞如酵母细胞可进行出芽生殖,哺乳动物细胞则通过有丝分裂增殖。
生长特性:贴壁细胞需附着表面生长(如成纤维细胞),悬浮细胞可在培养液中自由生长(如血液细胞);不同细胞分裂速度各异,如肿瘤细胞增殖较快,正常体细胞分裂较慢。
细胞冻存 (慢冻)
细胞冻存的目的是使细胞在超低温环境下(如液氮)进入休眠状态,以实现长期保存。关键在于缓慢降温,使细胞内的水分有足够时间渗出,从而减少细胞内冰晶的形成。
1. 冻存前准备
细胞状态:选择处于对数生长期、活力良好(存活率 >80%)、无污染的细胞进行冻存。此时的细胞代谢旺盛,对抗冻存损伤的能力更强。
冻存液配置:常规冻存液由冷冻保护剂(如10% DMSO)和冻存基质(如90% 胎牛血清或完全培养基)组成。DMSO等保护剂能提高细胞膜对水的通透性,帮助细胞内水分渗出,降低冰点,从而减少冰晶形成。
2. 标准操作流程
收集细胞:对于贴壁细胞,使用胰蛋白酶等消化液将其从培养皿上消化下来;悬浮细胞则可直接收集。通过离心去除旧的培养基。
重悬计数:弃去上清液,用配置好的冻存液重悬细胞沉淀,并进行细胞计数。
调整密度:根据细胞类型调整细胞浓度,通常推荐的冻存密度为 1×10⁶ 至 1×10⁷ 个细胞/毫升。
分装:将细胞悬液分装至专用的耐低温冻存管中,通常每管1-2毫升,并在管壁上清晰标记细胞名称、冻存日期、操作者等信息。
程序降温:
标准方法:使用程序降温盒(通常内含异丙醇)或程序降温仪,以 -1℃/min 的速率逐步降温至 -80℃。这个过程通常需要过夜。
替代方法:若无专业设备,可将冻存管放入4℃冰箱30分钟,再转入-20℃冰箱2小时,最后放入-80℃冰箱过夜。
长期保存:程序降温后,应尽快将冻存管转移至 液氮罐(-196℃) 的气相或液相中进行长期保存。若仅存放在-80℃冰箱,保存期限通常不超过6个月。
)🔥 细胞复苏
细胞复苏的目的是将休眠的细胞快速恢复到正常生长温度,同时避免冰晶在融化过程中重新形成,对细胞造成二次损伤。
1. 标准操作流程
快速解冻:从液氮罐中取出冻存管后,立即放入 37℃ 温水浴中,并不时轻轻晃动,使其在 1分钟内 迅速融化。
转移稀释:待细胞悬液完全融化后,用70%乙醇擦拭冻存管消毒,然后在超净台内打开,将细胞悬液缓慢加入含有预热培养基的离心管中,轻轻混匀。培养基的体积应为冻存液体积的10倍以上,以稀释并降低冻存液(如DMSO)的毒性。
离心换液:以1000 rpm离心5分钟,弃去上清液(含冻存液)。然后用新鲜的完全培养基重悬细胞沉淀。
接种培养:将重悬后的细胞接种到合适的培养容器中,放入37℃、5% CO₂的培养箱中静置培养。
更换培养基:建议在复苏后24小时更换一次新鲜培养基,以彻底去除残留的冻存液和死亡细胞碎片,然后继续培养。
公司正在出售的产品:
| 血液甘油三酯(triglyceride)含量酶连续循环反应比色法 |
HRP标记的程序性死亡配体1抗体 |
| 冰冻切片组织αSMA蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 |
钾通道蛋白1抗体 |
| 冰冻切片组织JNK/SAPK蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 |
RALYL蛋白抗体 |
| 血液(folic acid)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒 |
谷胱甘肽过氧化酶1 |
| 冰冻切片胶原纤维(MASSON)染色试剂盒 |
自然杀伤细胞凝集素样受体3(Ly 49c)抗体 |
| 组织总胆汁酸酶连续循环比色法定量检测试剂盒 |
有丝分裂控制蛋白dis3抗体 |
| 体外非细胞系统细胞色素P450亚酶CYP2B6(EFC)活性 |
APC标记小鼠CD25单克隆抗体 |
| 通用型乙酰酯酶活性化学发光法定量检测试剂盒 |
磷酸化β-肌动蛋白抗体 |
| 小量质粒抽提试剂盒 |
癌/睾丸抗原128抗体 |
| 细胞基质金属(MMP)总活性比色法定量检测试剂盒 |
59M人卵巢癌细胞KIAA2026蛋白抗体 |
| 动物硬组织高质纯化线粒体分离试剂盒 |
脱髓鞘相关蛋白SH3TC2N抗体 |
| 石蜡切片DNA分离试剂盒 |
FBXO22蛋白抗体 |
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