293FT人胚肾细胞

具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。
生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。
传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。
敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。
商品介绍
产品名称：293T人胚肾细胞
英文名称：293T
细胞别称；293T人胚肾细胞（STR鉴定正确）
种属来源；人
组织来源；肾
生长特性；贴壁生长
细胞形态；上皮细胞样
细胞代数；10代以内
背景简介；293细胞株插入SV40 T-抗原的温度敏感基因后产生的高转染效率的衍生株称为293T
STR位点；Amelogenin:X；CSF1PO:11,12；D13S317:12,14；D16S539:9,13；D18S51:17,18；D21S11:28,30.2；D3S1358:15,16,17；D5S818:8,9；D7S820:11；D8S1179:12,14；FGA:23；PentaD:9,10；PentaE:7,15；TH01:7,9.3；TPOX:11；VWA:16,19
生物等级；1
细胞规格；1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测；无
保藏机构；ATCC; CRL-3216 DSMZ; ACC-635；中国典型培养物保藏中心细胞库
倍时间；~24-30 hours
培养基；90% DMEM+10% FBS+PS
培养条件；气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃
冻存条件；无血清冻存液，液氮储存
基本操作步骤：

原代培养：取材→分离→培养，需保持材料新鲜及严格无菌。
传代培养：贴壁细胞需胰酶消化，悬浮细胞可直接传代，离心后重悬分瓶。
冻存与复苏：使用含10%DMSO的冻存液，程序降温后液氮保存；复苏时快速37℃水浴解冻。

1. 快速融化： 从液氮中取出冻存管，立即放入37℃水浴中，轻轻晃动，使其在1分钟内快速融化。
2. 转移与稀释： 将融化的细胞悬液转移至含预热完全培养基的离心管中，轻轻混匀，以稀释保护剂DMSO。
3. 离心与重悬： 离心后弃去上清液，用新鲜培养基重悬细胞沉淀。
4. 培养： 将细胞接种到培养瓶中，放入37℃、5% CO₂的培养箱中静置培养。

• 贴壁细胞：
  1. 消化： 吸弃旧培养基，用PBS缓冲液润洗后，加入胰酶（Trypsin）溶液，在37℃下消化1-5分钟，显微镜下观察到大部分细胞变圆脱落时，立即加入含血清的培养基终止消化。
  2. 吹打与计数： 轻轻吹打使细胞完全脱落，制成单细胞悬液，进行计数。
  3. 接种： 按一定比例（如1:3, 1:5）将细胞悬液接种到新的培养瓶中，补充新鲜培养基后放回培养箱。
• 悬浮细胞：
  1. 直接传代： 当细胞密度高、培养基变黄时，可直接将部分细胞悬液转移至新瓶，补充新鲜培养基即可。
  2. 离心传代： 若需去除细胞碎片，可将细胞悬液离心，弃去部分上清或全部上清后，用新鲜培养基重悬细胞，再按比例接种到新瓶中。

1. 贴壁细胞： 直接吸弃旧培养基，加入预热的新鲜完全培养基即可。
2. 悬浮细胞： 将细胞悬液离心，弃去旧培养基（上清液），用新鲜培养基重悬细胞沉淀。
   换液频率一般为2-3天一次，具体根据细胞密度和培养基颜色调整。

1. 收集细胞： 收集处于对数生长期的细胞，离心。
2. 配制冻存液： 用冻存液（常用含10% DMSO和20%胎牛血清的完全培养基）重悬细胞。
3. 程序降温： 将细胞分装至冻存管，放入程序降温盒中，于-80℃冰箱过夜。
4. 长期保存： 次日将冻存管转移至液氮罐中长期保存。

• 细菌污染： 培养基变浑浊、pH值下降（变黄），镜下可见大量快速移动的小颗粒。
• 真菌/酵母污染： 培养基中出现絮状、丝状团块，镜下可见酵母样出芽细胞或菌丝。
• 支原体污染： 培养基外观通常无明显变化，但细胞生长状态会变差，需通过专门试剂盒检测。