基本操作步骤:
原代培养:取材→分离→培养,需保持材料新鲜及严格无菌。
传代培养:贴壁细胞需胰酶消化,悬浮细胞可直接传代,离心后重悬分瓶。
冻存与复苏:使用含10%DMSO的冻存液,程序降温后液氮保存;复苏时快速37℃水浴解冻。
商品介绍
产品名称:143B 人骨肉瘤细胞
英文名称:143B
细胞别称;143B人骨肉瘤细胞(STR鉴定正确)
种属来源;人
组织来源;骨
生长特性;贴壁生长
细胞形态;上皮细胞样
细胞代数;10代以内
| 产品名称 |
143B 人骨肉瘤细胞 |
货号 |
LZ-01X1147 |
| 英文名 |
143B |
规格 |
1 × 10⁶ cells/T25 |
背景简介;143B细胞胸苷激酶阴性(TK-)。这是一个人骨肉瘤细胞系
细胞规格;1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测;无
培养基;90% DMEM+10% FBS+PS
培养条件;气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
冻存条件;无血清冻存液,液氮储存
细胞基于分子标记的检测方法
这类方法利用细胞表面或内部的特定分子(如抗原、核酸)进行高灵敏度、高特异性的检测。
免疫细胞化学法 (Immunocytochemistry, ICC):利用抗原-抗体反应,通过酶或荧光标记的抗体对细胞内的特定蛋白进行定位、定性和定量分析。
酶联免疫斑点技术 (ELISPOT):用于检测单个细胞分泌的特定蛋白质(如抗体、细胞因子),灵敏度极高。
聚合酶链式反应 (PCR) 及其衍生技术:如逆转录PCR (RT-PCR),通过检测细胞中特定基因的mRNA表达水平来分析细胞类型或状态,灵敏度远高于蛋白检测方法。
细胞培养的营养供给
培养基是细胞的“食物”,需要提供全面均衡的营养。
基础培养基: 如DMEM、RPMI-1640等,提供氨基酸、维生素、无机盐、葡萄糖等基本营养物质。
血清: 通常添加10%-20%的胎牛血清,以提供细胞生长所必需的生长因子、激素和贴壁因子。根据需求也可使用低血清的维持培养液。
其他添加物:
谷氨酰胺: 细胞生长的重要氮源,因在溶液中不稳定,需在使用前添加。
抗生素: 如青霉素-链霉素,可预防细菌污染。
细胞因子: 针对特定细胞(如免疫细胞),需添加特定的细胞因子(如白细胞介素-2)来促进其增殖和功能激活。
💧 湿度
培养箱湿度: 通常保持在 95% 以上。
目的: 防止培养基蒸发过快,从而维持培养体系的稳定体积和渗透压。
公司正在出售的产品:
| 食物钠离子(Na)浓度化学比色法定量检测试剂盒 |
Cy3标记的转甲状腺素蛋白/前白蛋白抗体 |
| ?COLLAGEN III蛋白表达西方杂交分析试剂盒 |
钾离子通道多聚体结构域蛋白12抗体 |
| 载玻片细胞IKB-ALPHA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 |
RABL5蛋白抗体 |
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谷草转氨酶抗体 |
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磷酸化Src原癌基因抗体 |
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δ氨基乙酰丙酸脱水酶抗体 |
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| 胶回收或PCR产物纯化试剂专题 |
FBXL12蛋白抗体 |
注意事项:
接收后处理:
收到细胞后静置 2–4 小时,使细胞恢复状态;
前 3 天每日拍照记录细胞形态与贴壁情况,便于问题追溯;
运输用灌液培养基不可继续使用,需更换为新配制的完全培养基。
污染防控:
定期用 75% 酒精擦拭培养箱内壁;
使用紫外灯照射培养箱内部至少 30 分钟;
水槽使用高压灭菌水或含铜离子溶液抑制微生物生长。
细胞活性检测:
收到后 7 天内可用台盼蓝染色法检测活力,低于 80% 可申请重发。
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