细胞介绍
| 中文名称 |
4T1+luc小鼠乳腺癌细胞荧光素酶标记 |
货号 |
YLS-XB10032 |
| 规格 |
1×10⁶/T25培养瓶 |
培养环境 |
气相:空气,95% |
细胞名称:4T1+luc小鼠乳腺癌细胞荧光素酶标记
4T1-Luc 细胞是一种经过基因工程改造的、稳定表达荧光素酶(Luciferase)的小鼠乳腺癌细胞。它是基于高度转移性的 4T1 细胞,通过慢病毒转染等方式导入了荧光素酶报告基因。
这种改造使得研究人员能够利用生物发光成像技术,对活体动物体内的肿瘤生长和转移过程进行实时、无创的动态监测,是乳腺癌研究中,尤其是转移机制和药物评价领域的强大工具。
核心构建与原理
4T1-Luc 细胞的构建主要基于慢病毒载体系统,过程如下:14
载体构建:将编码荧光素酶(Luc)的基因插入到慢病毒载体中,并配备一个强启动子(如CMV)来驱动其表达。
病毒包装:将重组载体转染至包装细胞(如HEK293T),生产出含有Luc基因的慢病毒颗粒。
细胞感染:用慢病毒颗粒感染亲本的4T1小鼠乳腺癌细胞。病毒会将Luc基因整合到4T1细胞的基因组中。
筛选与验证:通过载体上携带的抗性基因(如嘌呤霉素抗性)进行筛选,获得能稳定表达荧光素酶的单克隆细胞系,并通过检测酶活性来验证其表达水平和稳定性。
核心原理:当给接种了4T1-Luc细胞的小鼠注射荧光素酶的底物——荧光素(Luciferin)后,细胞内表达的荧光素酶会催化荧光素发生氧化反应,在氧气和ATP的参与下,产生生物发光(波长主要在550-570nm)。发光的强度与细胞数量成正比,从而可以被IVIS等活体成像系统捕捉和量化。
关键特性与应用
4T1-Luc细胞继承了4T1细胞的所有生物学特性,并增加了可成像的优势。
高度转移性:它保留了亲本4T1细胞的侵袭和转移能力。当注射到BALB/c小鼠体内时,它能自发地从原发灶(如乳腺脂肪垫或皮下)转移到肺、肝、淋巴结和大脑等远端器官,其生长和转移模式与人类IV期乳腺癌非常相似。
免疫兼容性:4T1细胞来源于BALB/c小鼠,可以在免疫系统完整的小鼠体内生长,这使得它成为研究肿瘤免疫微环境、评估免疫疗法的理想模型。
主要应用领域
应用领域 具体说明
肿瘤转移机制研究 通过尾静脉注射或原位注射,实时、动态地观察肿瘤细胞在活体内的转移路径和动力学过程,例如建立实验性肺转移模型。
药物筛选与疗效评价 在体外或体内实验中,通过检测生物发光信号的强弱,快速、定量地评估抗癌药物(如化疗药、靶向药、免疫检查点抑制剂)的疗效。
免疫治疗研究 利用其在免疫健全小鼠中的成瘤特性,研究肿瘤与免疫系统的相互作用,评估新型免疫疗法(如联合纳米载体、细胞裂解物疫苗)的有效性。
基础培养方法
4T1-Luc 细胞为贴壁生长的上皮样细胞,其培养条件相对标准。
培养基:常用 RPMI-1640 培养基,添加 10% 胎牛血清(FBS) 和 1% 双抗(青霉素-链霉素)。部分资料也提及可使用DMEM培养基。
培养条件:维持在 37℃、5% CO₂ 的恒温培养箱中。
传代操作:当细胞密度达到80%-90%时,使用0.25%胰蛋白酶(含EDTA)进行消化,通常按1:2至1:6的比例进行传代。
抗性维持:虽然细胞系已稳定整合Luc基因,但为确保荧光素酶表达的稳定性,培养基中有时会加入低浓度的嘌呤霉素(Puromycin)进行维持性筛选。
公司正在出售的产品:
| 冰冻切片组织CASPASE-3蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 |
酸敏感钾离子通道蛋白3抗体 |
| picric acid-orange G solution 溶液 |
G蛋白偶联受体GPR176蛋白抗体 |
| 组织氧化酶活性比色法定量检测试剂盒 |
T淋巴细胞识别的鳞状细胞癌SART3抗体 |
| 组蛋白H2B-K120乙酰化检测试剂盒 |
E1A激活基因刺激蛋白1抗体 |
| 细菌抗生素(链)敏感性DISC弥散(KIRBY-BAUER)检测试剂盒 |
通用型果胶化学比色法定量检测试剂盒 |
| PE-Cy7标记人CD64单克隆抗体 |
水样品内毒素比色法定量检测试剂盒 |
| 钙粘蛋白相关蛋白CTNNA3抗体 |
周期素B1抗体 |
| 组织ROCK激酶总活性定量检测试剂盒(A/B/C) |
5脂氧合酶激活蛋白抗体 |
| 酵母细胞周期G0期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒 |
跨膜丝氨酸蛋白酶5抗体 |
| 植物染色质免疫沉淀分析(CHIP)试剂盒 |
4T1+luc小鼠乳腺癌细胞荧光素酶标记血小板源性生长因子A抗体 |
| 细胞角蛋白16重组兔单克隆抗体 |
NF KAPPA B P50蛋白表达西方杂交分析试剂盒 |
| 肌球蛋白轻链7抗体 |
组织ROCK-II激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) |
培养操作要点
基础培养基选择:分为天然培养基、合成培养基(如DMEM、RPMI 1640)和无血清培养基。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。
培养条件设置:
温度:多数人和哺乳动物细胞为36-37℃,昆虫细胞为27℃。
pH值:多数哺乳动物细胞为7.4,昆虫细胞为6.2。
CO₂浓度:通常维持5-7% CO₂,多数细胞适合5% CO₂气氛。
渗透压:控制在260-320mOsm/kg为宜。
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