| 产品名称 |
人胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)ELISA试剂盒 |
英文名称 |
TSLP Elisa Kit |
| 规格 |
48T/96T |
货号 |
Y-E045 |
| 保存 |
2-8℃ |
用途 |
仅供科研 |
人胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)ELISA试剂盒是一种用于定量检测人源样本中TSLP蛋白浓度的科研工具。TSLP作为一种关键的2型细胞因子,在过敏性炎症(如哮喘、特应性皮炎)和免疫调节中扮演核心角色,因此该试剂盒在免疫学和过敏性疾病研究中具有重要价值。
以下为您详解该试剂盒的各个方面:
检测原理:

绝大多数人TSLP ELISA试剂盒采用双抗体夹心法。
固相抗体:酶标板微孔中预包被了特异性的抗人TSLP捕获抗体。
样本结合:加入样本后,其中的TSLP抗原与固相抗体特异性结合。
检测识别:随后加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体,它会与已结合的TSLP形成“夹心”复合物。
显色定量:加入TMB底物液后,HRP酶催化其显色(由无色变蓝),最后加入终止液使颜色由蓝变黄。在450nm波长下测定各孔的吸光度(OD值),样本中TSLP的浓度与OD值呈正相关,通过标准曲线即可计算出精确浓度。
主要组成成分:

一个标准的试剂盒通常包含以下组分:
预包被微孔板:96孔或48孔,包被有捕获抗体。
标准品:用于绘制标准曲线,通常为重组人TSLP蛋白,以不同浓度梯度提供。
检测抗体-HRP:识别TSLP的酶标二抗。
样本稀释液:用于稀释血清、血浆等样本,减少非特异性结合。
浓缩洗涤液:使用前需用蒸馏水稀释,用于洗去未结合的物质。
TMB显色液:底物溶液,需避光保存。
终止液:通常是硫酸溶液,用于终止酶促反应。
封板膜:用于孵育时密封微孔板。
适用样本类型
该试剂盒可用于定量检测多种样本中的人TSLP含量,包括:
血清和血浆(EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝)
细胞上清液(如PBMC培养上清)
组织匀浆(如皮肤、肺组织等)
其他体液(如支气管肺泡灌洗液、脑脊液、尿液等)
标准操作流程 (SOP):

准备:将试剂盒从2-8℃冷藏环境中取出,在室温(20-25℃)平衡15-30分钟。检查浓缩洗涤液是否有结晶,如有,需水浴加热溶解。
配液:按说明书比例用蒸馏水稀释浓缩洗涤液和显色液。
加样:在微孔中加入标准品或待测样本,每个样本建议设复孔以减少误差。
孵育:用封板膜封板,在37℃恒温箱中孵育(通常为30-60分钟,视具体说明书而定)。
洗涤:弃去孔内液体,用洗涤液注满每孔,静置后弃液,如此重复5次,并在吸水纸上拍干。
加酶与显色:每孔加入HRP标记的检测抗体,重复孵育和洗涤步骤。然后加入TMB显色液,37℃避光显色10-20分钟。
终止与读数:加入终止液后,需在15分钟内使用酶标仪在450nm波长下测定OD值。
结果计算
绘制标准曲线:以标准品浓度为横坐标,对应的平均OD值为纵坐标,在坐标纸上或使用Excel等软件绘制曲线。
计算浓度:根据待测样本的OD值,在标准曲线上查出对应的浓度,或代入直线回归方程计算。如果样本经过稀释,最终结果需要乘以稀释倍数。
关键注意事项:

样本处理:样本收集后应尽快检测。如需保存,应按一次用量分装,冻存于-20℃,并避免反复冻融。
操作精度:加样、孵育时间、洗涤等步骤必须严格按照说明书操作,任何偏差都可能影响结果的准确性。
安全防护:终止液通常为强酸,具有腐蚀性;TMB底物对光敏感且有一定毒性,操作时应佩戴手套,并做好防护。
试剂盒说明:不同品牌和货号的试剂盒在细节上可能存在差异(如孵育时间、标准品浓度范围),务必以随货说明书为准。"