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| 销售商： 上海研生实业有限公司 | 查看该公司所有产品 >> |
产品概述：
| 产品名称 | 人胸苷酸合成酶(TS)ELISA试剂盒 | 英文名称 | TS Elisa Kit |
| 规格 | 48T/96T | 货号 | Y-E932 |
| 保存 | 2-8℃ | 用途 | 仅供科研 |
TS（也称为TYMS）是DNA合成与修复过程中的关键酶，它催化脱氧尿苷酸（dUMP）转化为脱氧胸苷酸（dTMP）。由于TS在肿瘤细胞中通常高表达，且是5-氟尿嘧啶（5-FU）等化疗药物的主要作用靶点，因此检测其表达水平对于肿瘤生物学研究、化疗药物敏感性评估及耐药机制探讨具有重要意义。
以下我为你整理的该试剂盒详细操作与解析指南：
1. 试剂盒核心信息概览：
为了让你快速掌握该产品的关键参数，我整理了以下：
项目 详细信息
中文名称 人胸苷酸合成酶 (TS) ELISA试剂盒
英文名称 Human Thymidylate Synthase (TS) ELISA Kit
别名 TYMS, dTMP synthase, Thymidylate synthetase
检测方法 双抗体夹心法 (Sandwich ELISA)
规格 48T / 96T
检测范围 通常为 0.312 ～ 20 ng/mL
灵敏度 最低检测限通常 < 0.1 ng/mL (如0.078 ng/mL)
样本类型 血清、血浆（EDTA/肝素/柠檬酸盐）、细胞上清、组织匀浆
检测波长 450 nm
2. 检测原理：
试剂盒采用双抗体夹心ELISA法：
包被：酶标板微孔中预包被了抗人TS的特异性单克隆抗体（捕获抗体）。
结合：加入样本后，样本中的TS抗原与固相抗体特异性结合。
酶标反应：加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体，与已结合的TS抗原结合，形成“抗体-抗原-酶标抗体”夹心复合物。
显色与定量：加入TMB底物液，HRP催化底物显色（蓝色）。加入终止液后颜色由蓝变黄。在450nm波长下测定吸光度（OD值），OD值与样本中TS的浓度成正比，通过标准曲线计算出样本中TS的准确浓度。
3. 样本采集与处理（关键步骤）：
血清 (Serum)：
使用无热原试管收集血液，室温静置2小时使其完全凝固。
3000转/分（或1000×g）离心 10-20分钟，小心吸取上清液。
血浆 (Plasma)：
可使用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂。
混合均匀后，3000转/分离心 10-20分钟，取上清液检测。
组织/细胞：
组织匀浆：称取组织，加入适量生理盐水或PBS（pH 7.4）冰浴匀浆，离心取上清。
细胞上清：收集细胞培养液，离心去除细胞碎片。
保存：
若不立即检测，样本应分装后于 -20℃ 保存。
严禁反复冻融，以免蛋白降解影响结果。
4. 核心操作流程（通用版）：
平衡：试剂盒从冰箱（2-8℃）取出，在室温（18-25℃）平衡 15-30分钟。
配液：浓缩洗涤液（20×或30×）用蒸馏水稀释至1×（如有结晶，需温水浴溶解）。
加样：
设立标准品孔（梯度稀释）。
待测样本孔加入50-100μL样本。
建议做复孔以减少误差。
温育：封板膜封板，37℃温育 30-60分钟。
洗板：弃去孔内液体，每孔注满洗涤液，静置30秒后弃去，重复 5次，拍干。
加酶：每孔加入HRP标记的检测抗体100μL（空白孔除外）。
二次温育：37℃温育 30-60分钟。
洗板：同上。
显色：每孔加入TMB显色液A和B各50μL，37℃避光显色 15分钟。
终止：每孔加入50μL终止液，轻轻震荡混匀。
读数：在 15分钟内 于450nm波长下测定OD值。
结果计算与科研意义
标准曲线：以标准品浓度为横坐标（X），OD值为纵坐标（Y），绘制标准曲线。
浓度计算：将样本的OD值代入方程，计算出原始浓度。若样本经过稀释，需乘以稀释倍数。
科研意义：：
肿瘤化疗研究：TS是5-FU类药物的作用靶点，检测TS表达水平可预测肿瘤对5-FU的敏感性（TS低表达通常提示疗效较好）。
耐药机制：研究肿瘤细胞对化疗药物产生耐药性的分子机制。
细胞增殖标志物：TS参与DNA合成，其水平可反映细胞的增殖活性。"
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