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| 销售商： 上海研生实业有限公司 | 查看该公司所有产品 >> |
产品概述：
人衔接蛋白酶活化因子1（Apoptotic Protease Activating Factor 1, APAF1）ELISA试剂盒是一种用于体外定量检测人血清、血浆、细胞培养上清或组织匀浆中APAF1蛋白含量的高灵敏度免疫学工具。
公司正在出售的产品：
| 产品名称 | 人衔接蛋白酶活化因子1(APAF1)ELISA试剂盒 | 英文名称 | APAF1 ELISA Kit |
| 规格 | 48T/96T | 货号 | Y-E2966 |
| 保存 | 2-8℃ | 用途 | 仅供科研 |
APAF1是细胞凋亡（程序性死亡）线粒体途径中的关键接头蛋白，被称为“凋亡体”的核心组成部分。它在细胞受到凋亡信号刺激时，与细胞色素C和caspase-9结合，启动caspase级联反应，最终导致细胞死亡。因此，检测APAF1水平对于研究肿瘤发生、神经退行性疾病、化疗药物敏感性以及发育生物学具有重要意义。
以下我为你整理的该试剂盒详细操作与解析指南：
1. 试剂盒核心信息概览.
为了让你快速了解该产品的构成，我整理了以下参数表：
项目 详细信息
中文名称 人衔接蛋白酶活化因子1 (APAF1) ELISA试剂盒
英文名称 Human APAF1 ELISA Kit
检测方法 双抗体夹心法 (Sandwich ELISA)
规格 48T / 96T
检测范围 视品牌而定（常见：0-400 pg/mL 或 0.16-10 ng/mL）
灵敏度 最低检测限通常 < 1.0 pg/mL 至 0.09 ng/mL
样本类型 血清、血浆（EDTA/肝素/柠檬酸盐）、细胞上清、组织匀浆、尿液
检测波长 450 nm
2. 检测原理.
试剂盒采用双抗体夹心ELISA法：
包被：酶标板微孔中预包被了抗人APAF1的特异性捕获抗体。
结合：加入样本后，样本中的APAF1抗原与固相抗体特异性结合。
酶标反应：加入酶标记的检测抗体（如生物素化抗体）及亲和素-辣根过氧化物酶（HRP）复合物，形成免疫复合物。
显色与定量：加入TMB底物液，HRP催化底物显色（蓝色）。加入终止液后颜色由蓝变黄。在450nm波长下测定吸光度（OD值），OD值与样本中APAF1的浓度成正比，通过标准曲线计算出样本中APAF1的准确浓度。
样本采集与处理（关键步骤）.
血清 (Serum)：
使用无热原、无内毒素的试管收集血液，室温静置2小时使其完全凝固。
1000×g 离心10-20分钟，小心分离血清。
血浆 (Plasma)：
可使用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂。
混合均匀后，1000×g 离心15-30分钟，取上清液检测。
组织/细胞：
组织匀浆：称取组织，加入PBS（pH 7.4）冰浴匀浆，离心取上清。
细胞上清：收集细胞培养液，离心去除细胞碎片。
保存：
若不立即检测，样本应分装后于 -20℃ 或 -80℃ 保存。
严禁反复冻融。
4. 核心操作流程（通用版）.
平衡：试剂盒从冰箱（2-8℃）取出，在室温（18-25℃）平衡15-30分钟。
配液：浓缩洗涤液（20×或50×）用蒸馏水稀释至1×（如有结晶，需温水浴溶解）。
加样：
设立标准品孔（梯度稀释）。
待测样本孔加入50-100μL样本。
建议做复孔以减少误差。
温育：封板膜封板，37℃温育 30-60分钟。
洗板：弃去孔内液体，每孔注满洗涤液，静置30秒后弃去，重复3-5次，拍干。
加酶：每孔加入酶标工作液（检测抗体+亲和素-HRP）。
二次温育：37℃温育 30-60分钟。
洗板：同上。
显色：每孔加入TMB显色液，37℃避光显色 10-15分钟。
终止：每孔加入50μL终止液，轻轻震荡混匀。
读数：在15分钟内于450nm波长下测定OD值。
结果计算与科研意义.
标准曲线：以标准品浓度为横坐标（X），OD值为纵坐标（Y），绘制标准曲线。
浓度计算：将样本的OD值代入方程，计算出原始浓度。若样本经过稀释，需乘以稀释倍数。
科研意义：
肿瘤研究：APAF1表达缺失或下调与多种肿瘤（如白血病、黑色素瘤）的发生及化疗耐药性相关。
神经科学：在阿尔茨海默病、帕金森病等神经退行性疾病中，神经元的异常凋亡常伴随APAF1通路的激活。
药物筛选：用于评估药物是否通过线粒体途径诱导细胞凋亡。"
| 果糖待测样品处理试剂盒 | 植物染色质免疫沉淀分析（CHIP）完全试剂盒（包括抗体） |
| 人ELISA试剂盒 | 细胞角蛋白17单克隆抗体 |
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| 线虫β-半乳糖苷酶比色法定量检测试剂盒 | G蛋白信号转导调节因子6抗体 |
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| 钙粘蛋白相关蛋白受体BTR1抗体 | EFHC1蛋白抗体 |
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| 7号染色体开放阅读框28A抗体 | 石蜡切片组织CASPASE-10蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 |
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