| 产品名称 |
人脱氢表雄酮硫酸酯(DHEA-S)ELISA试剂盒 |
英文名称 |
DHEA-S Elisa Kit |
| 规格 |
48T/96T |
货号 |
Y-E718 |
| 保存 |
2-8℃ |
用途 |
仅供科研 |
人脱氢表雄酮硫酸酯(Dehydroepiandrosterone Sulfate, DHEA-S)ELISA试剂盒是一种用于体外定量检测人血清、血浆及相关生物液体中DHEA-S浓度的科研工具。DHEA-S是人体内含量最丰富的循环类固醇激素,主要由肾上腺皮质网状带分泌,是评估肾上腺功能和雄激素活性的重要生物标志物。
以下为您详解该试剂盒的相关信息:
🧪 检测原理:

人DHEA-S ELISA试剂盒通常采用竞争法(Competitive ELISA)原理:
包被:将抗人DHEA-S的特异性抗体包被在酶标板微孔中。
竞争结合:向微孔中加入标准品(或待测样本)和酶标结合物(通常是HRP标记的DHEA-S)。样本中的DHEA-S与酶标DHEA-S竞争结合微孔中有限的抗体位点。
洗涤:洗去未结合的游离物质。
显色与终止:加入TMB显色底物,HRP催化底物产生蓝色反应。加入终止液后,溶液颜色由蓝变黄。
测定:使用酶标仪在450 nm波长下测定吸光度(OD值)。样本中DHEA-S的浓度与OD值呈反比。即样本中DHEA-S浓度越高,它结合的抗体就越多,留给酶标DHEA-S结合的位点就越少,测得的OD值就越低。
主要组成:

不同品牌试剂盒的具体组分可能略有差异,以下是一个典型的配置示例:
组分名称 规格示例 (96孔) 主要用途
酶标包被板 96孔 预包被抗DHEA-S抗体。
标准品 1支 (0.5-1ml) 用于配制标准曲线(如0-1000 ng/mL)。
标准品稀释液 1瓶 用于溶解和稀释标准品。
样品稀释液 1瓶 用于稀释待测样本(如血清/血浆)。
酶标结合物 1瓶 HRP标记的DHEA-S,用于竞争反应。
显色剂A液/B液 各1瓶 TMB显色底物,反应后呈蓝色。
终止液 1瓶 终止反应,使溶液变黄。
浓缩洗涤液 1瓶 (20×/30×) 用于稀释后洗涤酶标板。
核心性能参数:

检测范围 (Sensitivity):不同品牌差异较大。例如,有的试剂盒检测范围为 15.63 - 1000 ng/mL,灵敏度为 9.38 ng/mL;有的检测范围为 2.0 - 50 pg/mL(需注意单位差异)。
特异性 (Specificity):能够特异性识别人DHEA-S,与脱氢表雄酮(DHEA)及其他类固醇激素(如睾酮、雌二醇)的交叉反应率极低。
适用样本类型:适用于血清、血浆(EDTA、肝素、柠檬酸盐抗凝)、细胞培养上清、尿液及组织匀浆等。
精密度 (Precision):板内变异系数(CV%)通常小于10%,板间变异系数小于15%。
操作步骤概览:

准备:试剂盒从冷藏环境中取出,在室温(20-25℃)下平衡15-30分钟。将浓缩洗涤液按说明书比例(如1:20或1:30)用去离子水稀释。
加样:设置标准品孔和待测样品孔。在相应孔中加入50-100μL标准品或样本。
温育:用封板膜封板,置于37℃恒温箱中温育30-60分钟。
洗涤:弃去孔内液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,重复5次,最后拍干。
加酶标试剂:每孔加入酶标结合物(空白孔除外),37℃温育30-60分钟,再次洗涤。
显色与终止:每孔加入TMB显色剂A、B各50μL,37℃避光显色10-15分钟,加入50μL终止液。
测定:以空白孔调零,在450 nm波长下测定各孔的OD值,并计算样本浓度。
注意事项:

样本处理:
血清/血浆:采集后尽快分离,避免溶血。-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
组织/细胞:需使用适当的裂解液进行匀浆和裂解,离心取上清检测。
试剂使用:
洗涤液结晶:浓洗涤液在低温下可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,不影响结果。
底物避光:显色剂对光敏感,应避光保存和使用。
禁忌:不能检测含有()的样本,因为会抑制HRP酶的活性。
操作规范:
温育:必须严格按照说明书规定的时间和温度进行温育。
读数:加入终止液后,应在15分钟内完成酶标仪读数。
洗涤:洗涤步骤是关键,必须确保洗板彻底,防止残留导致背景过高。"