产品描述
JAK2是具有酪氨酸激酶活性的蛋白,通过磷酸化下游STAT蛋白参与细胞因子信号传导、造血调控与肿瘤增殖过程,其异常激活与骨髓增殖性肿瘤、类风湿性关节炎相关,是肿瘤与炎症疾病研究的核心靶点。该活性蛋白可用于细胞因子信号调控与肿瘤增殖机制研究、肿瘤与炎症疾病药物筛选,适用于激酶活性检测、底物磷酸化分析、功能验证实验,也可用于抗体制备与肿瘤靶向治疗研究。
| 物种 |
Homo sapiens (Human,人) |
货号 |
GOY-01D3105 |
| 性状 |
冻干粉 |
实际分子量 |
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商品介绍
产品名称:Janus激酶2(JAK2)活性蛋白
物种:Homo sapiens (Human,人)
英文名称:Active Janus Kinase 2 (JAK2)
JTK10; Tyrosine-protein kinase JAK2
型号:GOY-01D3105
酶与激酶
物种:Homo sapiens (Human,人)
缓冲液成份:20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性状:冻干粉
纯度:> 90%
等电点:6.7
应用:Cellculture;ActivityAssays.
使用方法
复溶方法
推荐用ddH₂O复溶至0.1-1.0 mg/mL浓度
复溶时轻轻混匀,避免涡旋振荡防止蛋白变性
复溶后可根据需要分装,避免反复冻融
蛋白提取操作指南
实体组织蛋白提取
每1mL冷裂解液中加入10μL磷酸酶抑制剂、1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF,混匀后冰上备用
100mg组织剪碎成3mm×3mm小块,加入0.5-1mL冷裂解液,玻璃匀浆器手动匀浆15次(全程冰上操作)
匀浆液转移至预冷离心管,10000rpm,4℃离心5min
取上清即为全蛋白提取物,Bradford法或BCA法定量后,分装-70℃保存
培养细胞蛋白提取
贴壁细胞:吸去培养基,10mL冷PBS洗2次;悬浮细胞:1000rpm离心10min收集细胞,冷PBS洗2次
按细胞数量加入对应体积的裂解液(含抑制剂):
≥1×10⁷个细胞:0.5-1mL
5×10⁶个细胞:0.2-0.5mL
4℃温和振荡15min,14000rpm离心15min
取上清即为全蛋白提取物,定量后分装-70℃保存
使用注意事项
溶解与稀释: 使用前在冰上缓慢解冻。避免剧烈涡旋。稀释时,建议使用含相同去垢剂的缓冲液,以防止蛋白聚集失活。
去垢剂关键性: 本蛋白依赖去垢剂维持溶解状态。改变或去除去垢剂将导致蛋白沉淀失活。在实验设计中需考虑去垢剂对下游检测的潜在干扰。
二价阳离子需求: 是金属离子依赖性酶,需Mn²⁺或Mg²⁺作为辅因子。螯合剂(如EDTA)会完全抑制其活性。
质量控制: 每批产品应随附分析证书,包括SDS-PAGE图、Western Blot验证、内毒素水平和比活性数据。
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