人丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶(Serine/Threonine Protein Phosphatase, STK)ELISA试剂盒是一种用于体外定量检测生物样本中STK蛋白含量的科研工具。STK(有时在文献或试剂盒中也指代相关的激酶或磷酸酶活性标志物)在细胞信号转导、细胞周期调控、代谢及神经退行性疾病研究中扮演着重要角色。
该试剂盒通常采用双抗体夹心法(Sandwich ELISA)原理:12
包被:微孔板上预包被抗人STK的特异性捕获抗体。
加样:将标准品(梯度浓度)或待测样本加入微孔中,样本中的STK与固相抗体结合。
孵育与洗涤:温育后洗去未结合的物质。
酶标反应:加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体,形成“固相抗体-抗原-STK-酶标抗体”夹心复合物。
显色与终止:加入TMB底物显色(蓝色),随后加入硫酸终止液终止反应(变为黄色)。
测定:在酶标仪450nm波长处测定吸光度(OD值),样本中STK的浓度与OD值呈正比。
典型性能参数.
参数项 典型数值/描述
检测范围 15.6 pg/mL – 1000 pg/mL (部分品牌为1.5-48 ng/mL)
灵敏度 < 10 pg/mL (最低检测限)
反应时间 约 2 – 3小时
样本类型 血清、血浆(EDTA/肝素)、组织匀浆、细胞培养上清等
种属特异性 人(Homo sapiens)
精密度 板内/板间变异系数(CV)均小于 10% - 15
适用样本类型.
该试剂盒可用于定量检测多种类型的生物样本:
血清:全血室温放置2小时或4℃过夜,离心取上清。
血浆:使用EDTA或肝素抗凝,采集后30分钟内离心取上清。
组织匀浆:按重量(g):体积(ml)=1:9的比例加入匀浆介质,在冰浴条件下匀浆后离心取上清。
细胞培养上清:离心去除细胞碎片后使用。
样本保存:若不立即检测,建议分装后于-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
注意事项.
为确保实验结果的准确性和安全性,请务必注意以下事项:
严禁NaN₃:样本及试剂中不能含有(NaN₃),因为它会抑制辣根过氧化物酶(HRP)的活性,导致显色失败。
试剂平衡:试剂盒从冰箱(2-8℃)取出后,需在室温(20-25℃)平衡15-60分钟后再打开使用。浓缩洗涤液若有结晶,属正常现象,可水浴加热溶解。
洗板规范:洗板是影响结果的关键。手工洗板需重复5次,拍干,防止残留物引起背景过深。
避免溶血:标本溶血会严重影响检测结果,应尽量避免。
用途限制:本产品仅用于科学研究,不用于临床诊断。"