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| 销售商： 上海研生实业有限公司 | 查看该公司所有产品 >> |
产品概述：
以下为您详解该试剂盒的相关信息：
公司正在出售的产品：
人水通道蛋白2（Aquaporin 2, AQP-2）ELISA试剂盒是一种用于体外定量检测人样本中AQP-2蛋白浓度的科研工具。AQP-2是肾脏集合管主细胞顶膜上的水通道蛋白，受抗利尿激素（血管加压素）调节，在尿液浓缩和稀释过程中起着决定性作用。其检测对于研究尿崩症、心力衰竭、肝硬化及肾病综合征等水代谢紊乱疾病具有重要意义。
| 产品名称 | 人水通道蛋白2(AQP-2)ELISA试剂盒 | 英文名称 | AQP-2 Elisa Kit |
| 规格 | 48T/96T | 货号 | Y-E3141 |
| 保存 | 2-8℃ | 用途 | 仅供科研 |
🧪 检测原理.
人AQP-2 ELISA试剂盒通常采用双抗体夹心法（Sandwich ELISA）原理：
包被：将抗人AQP-2的特异性单克隆抗体预先包被在酶标板微孔中，形成固相抗体。
加样与结合：加入待测样本（如尿液、血清）或标准品。样本中的AQP-2抗原与固相抗体特异性结合。
加检测抗体：加入酶标记（通常为辣根过氧化物酶HRP）的检测抗体，形成“固相抗体-AQP-2-酶标抗体”的夹心复合物。
洗涤：洗去未结合的游离酶标抗体。
显色与终止：加入TMB显色底物，HRP催化底物产生蓝色反应。加入终止液（通常为硫酸）后，溶液颜色由蓝变黄。
测定：使用酶标仪在450 nm波长下测定吸光度（OD值）。样本中AQP-2的浓度与OD值呈正比，通过标准曲线计算出其精确浓度。
主要组成.
不同品牌试剂盒的具体组分可能略有差异，以下是一个典型的配置示例：
组分名称 规格示例 (96孔) 主要用途
酶标包被板 96孔 (12条 × 8孔) 预包被捕获抗体，用于捕获样本中的AQP-。
标准品 1支 (冻干/液体) 用于配制标准曲线，浓度涵盖检测范围（如0-20 ng/mL）。
标准品稀释液 1瓶 用于溶解和稀释标准品。
样品稀释液 1瓶 用于稀释待测样本（如尿液/血清）。
检测抗体-HRP 1瓶 辣根过氧化物酶标记的检测抗体，用于催化显色。
显色剂 (TMB) A液、B液 显色底物，反应后呈蓝色。
终止液 1瓶 (硫酸) 终止反应，使溶液变黄。
浓缩洗涤液 1瓶 (20×/30×) 用于稀释后洗涤酶标板，去除非特异性结合物。
注意事项。
核心性能参数.
检测范围 (Sensitivity)：不同品牌差异较大。例如，有的试剂盒检测范围为 0.312 - 20 ng/mL，灵敏度可达 小于0.1 ng/mL；有的检测范围为 0.156 - 10 ng/mL。
特异性 (Specificity)：能够特异性识别人AQP-2，识别天然和重组人AQP-2，与其它水通道蛋白（如AQP-1, AQP-3）无明显交叉反应。
适用样本类型：适用于尿液（需肌酐校正）、血清、血浆（EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝）、组织匀浆（肾组织）、细胞裂解液及细胞培养上清等。
精密度 (Precision)：板内变异系数（CV%）通常小于10%，板间变异系数小于15%。
操作步骤概览.
准备：试剂盒从冷藏环境中取出，在室温（20-25℃）下平衡15-30分钟。将浓缩洗涤液按说明书比例（如1:20）用去离子水稀释。
加样：设置标准品孔和待测样品孔。在相应孔中加入50-100μL标准品或样本。
温育：用封板膜封板，置于37℃恒温箱中温育30-60分钟。
洗涤：弃去孔内液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，重复5次，最后拍干。
加酶标试剂：每孔加入检测抗体-HRP（空白孔除外），37℃温育30-60分钟，再次洗涤。
显色与终止：每孔加入TMB显色剂A、B各50μL，37℃避光显色10-15分钟，加入50μL终止液。
测定：以空白孔调零，在450 nm波长下测定各孔的OD值，并计算样本浓度。
注意事项.
样本处理：
尿液：尿液样本是检测AQP-2的常用样本。由于尿液浓度受饮水影响大，检测结果通常需要同步检测尿肌酐（Creatinine）进行校正，以“ng/mg Cr”表示。
血清/血浆：避免溶血和脂血样本。采集后若不立即检测，应分装冻存于-20℃，避免反复冻融。
组织/细胞：需使用适当的裂解液（如RIPA）进行匀浆和裂解，离心取上清检测。
试剂使用：
洗涤液结晶：浓洗涤液在低温下可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，不影响结果。
底物避光：显色剂请避光保存，使用前现配现用。
禁止混用：不同批次的试剂盒组分严禁混用。
操作规范：
温育：必须严格按照说明书规定的时间和温度进行温育。
读数：加入终止液后，应在15分钟内完成酶标仪读数。
洗涤：洗涤步骤是关键，必须确保洗板彻底，防止残留导致背景过高。"
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