人肾上腺皮质抗体(Adrenal Cortex Antibody, ACA)ELISA试剂盒是一种用于体外定量检测人血清或血浆中肾上腺皮质抗体含量的免疫学工具。
ACA是自身免疫性肾上腺炎(如阿狄森病)的重要血清学标志物。检测ACA水平对于自身免疫性肾上腺功能不全的辅助诊断、高危人群筛查及自身免疫性多内分泌腺病综合征的研究具有重要临床和科研价值。
1. 试剂盒核心信息概览.
为了让你快速了解该产品的构成,我整理了以下参数表:
项目 详细信息
中文名称 人肾上腺皮质抗体 (ACA) ELISA试剂盒
英文名称 Human Adrenal Cortex Antibody (ACA) ELISA Kit
检测方法 间接法 (Indirect ELISA)
规格 48T / 96T
检测范围 视具体说明书而定(通常包含阴性/阳性判断值)
样本类型 血清、血浆(EDTA/柠檬酸盐/肝素)
检测波长 450 nm
2. 检测原理.
试剂盒通常采用间接ELISA法原理:
包被:酶标板微孔中预包被了肾上腺皮质组织的可溶性抗原(或相关特异性抗原)。
结合:加入待测样本后,样本中存在的ACA抗体会与固相上的抗原特异性结合。
酶标反应:加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗人IgG(或抗人总抗体)二抗,与已结合的ACA抗体结合。
显色与定量:加入TMB底物液显色。若样本中ACA含量高,则结合的酶多,显色深;反之则浅。通过测定450nm处的吸光度(OD值),并与临界值比较,判断样本为阳性或阴性。
3. 样本采集与处理(关键步骤).
血清 (Serum):
使用无热原、无内毒素的试管收集血液,室温静置30分钟使其自然凝固。
3000转/分离心10分钟,小心吸取上清液。
血浆 (Plasma):
可使用EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂。
混合均匀后,3000转/分离心30分钟,取上清液。
保存:
若不立即检测,样本应分装后于 -20℃ 保存。
严禁反复冻融。
4. 核心操作流程(通用版).
平衡:试剂盒从冰箱(2-8℃)取出,在室温(18-25℃)平衡15-30分钟。
配液:浓缩洗涤液(20×或30×)用蒸馏水稀释至1×(如有结晶,需温水浴溶解)。
加样:
设立阴阳性对照孔及空白孔。
待测样本孔加入10-50μL样本(具体体积视说明书而定,有时需稀释)。
建议做复孔以减少误差。
温育:封板膜封板,37℃温育 30-60分钟。
洗板:弃去孔内液体,每孔注满洗涤液,静置30秒后弃去,重复5次,拍干。
加酶:每孔加入HRP标记的检测抗体100μL(空白孔除外)。
二次温育:37℃温育 30-60分钟。
洗板:同上。
显色:每孔加入TMB显色液A和B各50μL,37℃避光显色 15分钟。
终止:每孔加入50μL终止液,轻轻震荡混匀。
读数:在15分钟内于450nm波长下测定OD值。
5. 结果判断与临床意义.
定性判断(阴阳性):
计算CUTOFF值(通常为阴性对照均值 + 0.10或0.15)。
样本OD值 ≥ CUTOFF值为阳性。
临床意义:
阿狄森病(Addison's Disease):约70%-90%的自身免疫性阿狄森病患者血清中可检测到高滴度的ACA。
自身免疫性多内分泌腺病综合征(APS):ACA常与其他自身抗体(如抗甲状腺抗体、抗胰岛细胞抗体)同时出现。
特发性肾上腺萎缩:ACA检测有助于区分病因。"