人神经营养因子4(Neurotrophin-4, NT-4)ELISA试剂盒是一种用于体外定量检测人源样本中NT-4蛋白浓度的科研工具。NT-4属于神经营养因子家族,对于神经元的存活、分化、突触可塑性以及损伤后的修复具有关键调节作用,在神经科学和再生医学研究中具有重要价值。
🧪 检测原理.
试剂盒通常采用双抗体夹心法(Sandwich ELISA)原理:
包被:微孔板上预包被具有特异性的人NT-4单克隆抗体。
加样:将标准品(梯度浓度的重组NT-4)或待测样本加入微孔中,样本中的NT-4与固相抗体结合。
酶标反应:加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体,形成“固相抗体-抗原-NT-4-酶标抗体”夹心复合物。
显色:加入底物TMB(四甲基联苯胺),在HRP的催化下生成蓝色产物。
终止与测定:加入硫酸终止液,溶液颜色由蓝变黄。使用酶标仪在450nm波长处测定吸光度(OD值)。样本中NT-4的浓度与OD值呈正比。
典型性能参数.
参数项 典型数值/描述
检测范围 31.2 pg/mL – 2000 pg/mL(部分品牌为25-800 pg/mL)
灵敏度 < 15 pg/mL(最低检测限)
反应时间 约 2 – 3小时
样本类型 血清、血浆(EDTA/肝素)、组织匀浆、细胞培养上清等
种属特异性 人(Homo sapiens)
精密度 板内/板间变异系数(CV)< 10%
🩸 适用样本类型.
该试剂盒可用于定量检测多种类型的生物样本:
血清/血浆:用于评估体内NT-4的循环水平。
组织匀浆:用于测定脑组织、脊髓或其他组织中的NT-4含量(推荐使用预冷PBS匀浆,冰上研磨)。
细胞培养上清:用于检测神经细胞或转染细胞分泌的NT-。
样本保存:若不立即检测,建议分装后于-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
注意事项.
为确保实验结果的准确性和安全性,请务必注意以下事项:
严禁NaN₃:样本及试剂中不能含有(NaN₃),因为它会抑制辣根过氧化物酶(HRP)的活性,导致显色失败。
试剂平衡:试剂盒从冰箱(2-8℃)取出后,需在室温(20-25℃)平衡15-60分钟后再打开使用。浓缩洗涤液若有结晶,属正常现象,可水浴加热溶解。
洗板规范:洗板是影响结果的关键。手工洗板需重复5次,拍干,防止残留物引起背景过深。
安全防护:终止液具有强腐蚀性,底物对光敏感,操作时请佩戴手套和护目镜,并避光保存试剂。
用途限制:本产品仅用于科学研究,不用于临床诊断。"