按品牌选择
 |
|
|||||||||||||||||||||||||||||
| [发表评论] [本类其他产品] [本类其他供应商] [收藏] | ||||||||||||||||||||||||||||||
| 销售商： 上海谷研实业有限公司 | 查看该公司所有产品 >> |
产品描述
ENDOG是定位于线粒体的核酸内切酶，在细胞凋亡过程中释放至细胞核，催化DNA片段化，同时参与线粒体DNA复制与损伤修复，其功能异常与神经退行性疾病、肿瘤发生相关，是细胞凋亡与线粒体研究的重要靶点。该重组蛋白可用于细胞凋亡机制研究、线粒体疾病靶点筛选，适用于核酸酶活性测定、DNA片段化实验、免疫共沉淀，也可用于抗体制备与疾病病理检测试剂研发。
| 物种 | Homo sapiens (Human，人) | 货号 | GOY-01D1962 |
| 性状 | 冻干粉 | 实际分子量 | 34kDa(差异分析请参阅说明书) |
商品介绍
产品名称：内切核酸酶G(ENDOG)重组蛋白
物种：Homo sapiens (Human，人)
英文名称：Recombinant Endonuclease G, Mitochondrial (ENDOG)
ENDO-G
型号：GOY-01D1962
酶与激酶
发育科学
物种：Homo sapiens (Human，人)
来源：原核表达
宿主E.coli
内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位：：线粒体
预测分子量：34.2KDa
实际分子量：34kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签：Leu16~Lys290 with N-terminal His Tag
缓冲液成份：PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.
性状：冻干粉
纯度：> 97%
等电点：9.2
应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格10μg50μg200μg1mg5mg
重组蛋白实验核心流程
重组蛋白实验本质是通过基因工程技术，让宿主细胞表达目标蛋白，再经过分离纯化得到可用的蛋白，核心流程分为5个关键步骤：
1. 目的基因的获取与优化
基因来源：可以从cDNA文库中PCR扩增、人工合成，或者从基因组DNA中克隆（针对原核生物）
密码子优化：根据宿主细胞（如大肠杆菌、CHO细胞）的密码子偏好性优化基因序列，提升蛋白表达量
关键元件添加：在基因两端添加酶切位点、标签序列（His-tag、GST-tag）、信号肽等，方便后续克隆、表达和纯化
2. 重组表达载体构建
载体选择：根据宿主类型选择对应的载体，原核常用pET、pGEX系列；真核常用pcDNA、pPICZ系列
克隆方法：通过限制性内切酶酶切+连接酶连接，或同源重组、Gateway克隆等方法，将目的基因插入载体
载体验证：通过菌落PCR、酶切鉴定和DNA测序，确认重组载体构建成功
3. 宿主细胞转化/转染
原核宿主：常用大肠杆菌BL21(DE3)，通过热激法或电穿孔法将重组质粒导入细胞
真核宿主：分为哺乳动物细胞（CHO、HEK293）、酵母（毕赤酵母、酿酒酵母）、昆虫细胞等，采用脂质体转染、电转、病毒感染等方法
阳性筛选：利用载体上的抗性基因（如氨苄青霉素、新霉素）筛选成功导入重组载体的细胞
4. 重组蛋白诱导表达
原核表达诱导：常用IPTG诱导lac启动子，控制诱导温度（16-37℃）、IPTG浓度（0.1-1mM）和诱导时间（4-24h），优化表达条件
真核表达诱导：哺乳动物细胞常用瞬时表达或稳定表达系；酵母常用甲醇诱导AOX启动子；昆虫细胞通过病毒感染后表达
表达形式判断：通过SDS-PAGE和Western Blot检测蛋白表达，判断是可溶性表达还是包涵体表达
5. 重组蛋白分离纯化
包涵体处理：如果形成包涵体，需要先裂解细胞，收集包涵体，再通过变性、复性获得有活性的蛋白
可溶性蛋白纯化：利用标签序列进行亲和层析（Ni-NTA亲和柱纯化His-tag蛋白），再通过离子交换层析、凝胶过滤层析等方法进一步纯化
蛋白鉴定：通过SDS-PAGE、Western Blot、质谱分析等方法验证蛋白的纯度和正确性
活性检测：根据蛋白的功能特性，选择对应的活性检测方法（如酶活测定、ELISA、细胞实验等）
应用范围
免疫学研究：作为阳性对照或免疫原用于抗体生产。
分子检测：Western Blot（WB）、SDS-PAGE分析。
功能研究：参与糖酵解途径、肿瘤免疫调控等机制研究。
检测方法
Lowry法：碱性条件下与铜离子反应生成络合物，750nm比色定量。
SDS-PAGE：考马斯亮蓝染色验证分子量及纯度。
注意
溶解建议：使用无菌PBS或去离子水复溶，避免剧烈震荡。
实验用途：仅限科研，不适用于临床诊断或治疗。
公司正在出售的产品
公司正在出售的产品
| AMP激活蛋白激酶γ1(PRKAg1)重组蛋白 | 磷酸化RhoA蛋白封闭多肽 |
| 支链转氨酶1(BCAT1)重组蛋白 | 乳糖神经酰胺4-α-半乳糖基转移酶封闭多肽 |
| 5'-3'外切核糖核酸酶1(XRN1)重组蛋白 | 血管紧张素原封闭多肽 |
| 中性葡糖苷酶αAB(GaNAB)重组蛋白 | 磷酸化Runx3封闭多肽 |
| 鞘氨醇激酶2(SPHK2)重组蛋白 | 载脂蛋白样蛋白6封闭多肽 |
| 葡萄糖磷酸变位酶3(PGM3)重组蛋白 | 活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-9封闭多肽 |
| 铁氧还蛋白还原酶(FDXR)重组蛋白 | 肾上腺皮质线粒体铁氧还蛋白封闭多肽 |
| 脂肪酶I(LIPI)重组蛋白 | 环指蛋白186封闭多肽 |
| 羧酸酯酶3(CES3)重组蛋白 | Kelch样蛋白18封闭多肽 |
| 激活蛋白C(APC)重组蛋白 | 醋酸赖加压素 |
| 肌肽酶2(CNDP2)重组蛋白 | 半胱氨酰白三烯受体2型封闭多肽 |
| 腺苷酸激酶1(AK1)重组蛋白 | 蛋白激酶C亚型G封闭多肽 |
| 泛酸激酶2(PANK2)重组蛋白 | 内切核酸酶G(ENDOG)重组蛋白磷酸化成纤维细胞生长因子受体3封闭多肽 |
| 泛素样修饰激活酶5(UBA5)重组蛋白 | 含普列克底物蛋白家族B成员2封闭多肽 |
| 尿苷胞苷激酶1(UCK1)重组蛋白 | HIST1H2BJ蛋白封闭多肽 |
Copyright(C) 1998-2026 生物器材网 电话：021-64166852;13621656896 E-mail：info@bio-equip.com