产品描述
甲硫腺苷磷酸化酶(MTAP)是嘌呤代谢通路的关键酶,能够催化甲硫腺苷水解为腺嘌呤和5'-甲硫核糖-1-磷酸,参与甲硫氨酸和嘌呤的合成与循环,维持细胞内核苷酸和甲硫氨酸的稳态。MTAP基因在多种肿瘤中频繁缺失或突变,导致嘌呤代谢紊乱和甲硫氨酸依赖,同时也与肿瘤细胞的耐药性相关,其缺失状态可作为肿瘤治疗的潜在靶点。MTAP重组蛋白多采用原核表达系统制备,带有His-tag标签,纯度可达95%以上,可应用于嘌呤代谢机制研究、肿瘤代谢分析、MTAP酶活性检测及抗肿瘤药物研发等领域。
商品介绍
| 物种 |
Homo sapiens (Human,人) |
货号 |
GOY-01D845 |
| 性状 |
冻干粉 |
实际分子量 |
31kDa(差异分析请参阅说明书) |
产品名称:甲硫腺苷磷酸化酶(MTAP)重组蛋白
物种:Homo sapiens (Human,人)
英文名称:Recombinant Methylthioadenosine Phosphorylase (MTAP)
MSAP; S-methyl-5'-thioadenosine phosphorylase
型号:GOY-01D845
酶与激酶
物种:Homo sapiens (Human,人)
来源:原核表达
宿主E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位::细胞核, 细胞质
预测分子量:30.9kDa
实际分子量:31kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Lys11~Pro256 with N-terminal His Tag
缓冲液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.
性状:冻干粉
纯度:> 90%
等电点:6.7
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格10μg50μg200μg1mg5mg
产品形式与缓冲液
产品形式:冻干粉(真空冷冻干燥)
储存缓冲液:20 mM Tris-HCl(pH 8.0)、150 mM NaCl、1 mM DTT、5% 甘油(冻干前体系)
储存与稳定性
短期保存:2–8℃,可稳定保存 4 周
长期保存:-20℃(≤6 个月)、-80℃(≤12 个月),建议分装后保存
稳定性提示:避免反复冻融(≤3 次),冻干粉复溶后需立即分装,-80℃保存;室温放置不超过 2 小时,防止活性丧失
复溶与使用方法
(一)复溶步骤
取出冻干粉,室温平衡 10–15 分钟,避免直接开盖受潮
按推荐体积加入无菌去离子水或PBS(pH 7.4),轻轻颠倒离心管混匀,禁止涡旋震荡
静置 20–30 分钟至完全溶解,复溶后浓度为 0.5–1.0 mg/mL(可根据实验需求调整)
复溶后若有少量沉淀,4℃、12000 rpm 离心 5 分钟,取上清使用
(二)使用建议
酶活实验:用反应缓冲液(50 mM Tris-HCl pH 7.5、1 mM EDTA、1 mM DTT)稀释至工作浓度,37℃孵育 10–30 分钟,检测底物水解效率
免疫实验:作为免疫原制备特异性抗体,或作为 Western Blot、ELISA、免疫组化的阳性对照(推荐上样量 0.1–0.5 μg)
细胞实验:用无血清培养基稀释,处理细胞后检测细胞迁移、侵袭、骨架重排等表型
质量控制
SDS-PAGE 验证:单一主条带,无明显杂带,纯度≥95%
内毒素检测:鲎试剂法检测,内毒素<1.0 EU/μg,符合细胞实验要求
活性验证:以特异性荧光底物检测蛋白酶活性,活性单位≥50 U/mg
无菌检测:无细菌、真菌、支原体污染
Western Blot 验证:抗 His 标签抗体、特异性抗体均能识别目标条带
使用注意事项
操作时佩戴无菌手套、口罩,在超净台内进行复溶与稀释,避免蛋白污染
复溶和稀释用试剂需无菌,防止微生物污染导致蛋白降解
不同批次产品可能存在轻微活性差异,建议实验前做预实验验证
废弃试剂需按实验室生物安全规范处理,避免随意丢弃
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