产品描述
顺乌头酸酶1(ACO1)重组蛋白以大肠杆菌表达,纯度≥95%,保留天然酶活性,催化柠檬酸与异柠檬酸相互转化,参与三羧酸循环和铁稳态调控,功能异常会导致缺铁性贫血、神经退行性疾病。产品需-20℃保存避免反复冻融,添加铁离子可增强稳定性,可用于代谢性疾病研究、铁稳态机制探讨及药物筛选。
| 产品名称 |
顺乌头酸酶1(ACO1)重组蛋白
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物种 |
Homo sapiens (Human,人) |
| 型号 |
GOY-01D970 |
来源 |
原核表达 |
| 预测分子量 |
26.2kDa |
实际分子量 |
26kDa(差异分析请参阅说明书) |
商品详情
产品名称:顺乌头酸酶1(ACO1)重组蛋白
物种:Homo sapiens (Human,人)
英文名称:Recombinant Aconitase 1 (ACO1)
IREB1; IRP1; IREBP; Iron regulatory protein 1; Iron-responsive element-binding protein 1; Cytoplasmic aconitate hydratase; Citrate hydro-lyase; Ferritin repressor protein
型号:GOY-01D970
酶与激酶
物种:Homo sapiens (Human,人)
来源:原核表达
宿主E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位::Cytoplasm
预测分子量:26.2kDa
实际分子量:26kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Lys26~Ile243 with
缓冲液成份:磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性状:冻干粉
纯度:> 95%
等电点:5.8
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
质量控制
纯度: > 90%(通过考马斯亮蓝染色的SDS-PAGE和SEC-HPLC分析确认)。由于在表达和纯化过程中可能存在部分降解或翻译后修饰异质性,纯度略低于常规酶类。
内毒素: < 0.1 EU/µg(通过高灵敏度鲎试剂LAL法测定),适用于细胞功能实验。
生物活性(功能验证):
结合活性验证:通过 表面等离子共振(SPR) 证实,本品可与 微管蛋白(Tubulin) 特异性结合,测算的Kd值在低微摩尔范围内,与文献报道一致。
细胞功能验证:在体外细胞划痕实验中,添加本品(作为功能获得性干预)至特定细胞系(如人脐静脉内皮细胞HUVEC),可观察到对细胞迁移的显著抑制作用,重现其已知的负向调控细胞迁移的生物学功能。
一致性验证:Western Blot分析显示,本品可与商品化的抗体(C端)及抗-FLAG抗体、抗-His抗体发生特异性反应。
使用说明
解冻与准备:于冰上缓慢解冻,或短暂置于25°C水浴。解冻后,轻柔上下颠倒数次混匀,避免涡旋振荡,以防二聚体解离或功能丧失。
稀释:使用前,在冰上用预冷的含0.1-1% BSA或载体蛋白的PBS或细胞培养基(用于细胞实验)进行稀释。切勿直接用无蛋白缓冲液或纯水稀释,以防非特异性吸附至容器壁导致损失。
工作浓度建议:
生化结合实验:0.1 - 5 µg/mL。
细胞功能实验:10 - 500 ng/mL(需根据细胞类型和实验目的进行梯度优化)。
储存:长期储存于-80°C。强烈建议按单次实验用量(如10 µL/支)进行分装,避免反复冻融(≤3次)。稀释后的溶液应在4°C保存并于当天使用。
注意事项
功能特殊性: 不具备蛋白酶活性。其功能主要通过蛋白质相互作用实现,实验设计请勿以检测蛋白水解活性为终点。
钙离子与螯合剂: 实验缓冲液中避免使用EGTA/EDTA,否则会导致蛋白失稳。如需研究钙离子效应,请精确控制钙离子浓度。
还原剂: 含有多个半胱氨酸,操作和储存过程中需保持还原环境以防止氧化聚集。
阳性对照: 建议用户准备典型钙蛋白酶作为酶活阴性对照的参照。
安全警告: 本品仅供科研使用。
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