产品描述
核黄素激酶(RFK)重组蛋白多以大肠杆菌为表达宿主,带有His标签,纯度≥95%,保留天然酶活性。该蛋白催化核黄素磷酸化生成黄素单核苷酸(FMN),是核黄素代谢关键酶,其功能异常会导致核黄素缺乏症、神经系统疾病。产品需-20℃保存避免反复冻融,添加甘油可增强稳定性,可用于核黄素代谢机制研究、营养缺乏病药物筛选及分子诊断试剂开发。
| 产品名称 |
核黄素激酶(RFK)重组蛋白
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物种 |
Homo sapiens (Human,人) |
| 型号 |
GOY-01D906 |
来源 |
原核表达 |
| 预测分子量 |
47.6kDa |
实际分子量 |
48kDa(差异分析请参阅说明书) |
商品详情
产品名称:核黄素激酶(RFK)重组蛋白
物种:Homo sapiens (Human,人)
英文名称:Recombinant Riboflavin Kinase (RFK)
RIFK; Flavokinase; ATP:riboflavin 5'-phosphotransferase
型号:GOY-01D906
酶与激酶
物种:Homo sapiens (Human,人)
来源:原核表达
宿主E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位::细胞质
预测分子量:47.6kDa
实际分子量:48kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Met1~His155 with N-terminal His and GST Tag
缓冲液成份:100mM NaHCO3, 500mM NaCl缓冲液(pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性状:冻干粉
纯度:> 95%
等电点:7.9
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
活性数据
活性测定方法: 采用分光光度法连续监测在 340 nm 处 NADPH 的消耗(氧化反应)或生成(还原反应)。
标准反应体系 (还原反应方向): 50 mM 磷酸钾缓冲液 (pH 7.4), 0.2 mM NADPH, 50 µM 雄烯二酮, 25-50 ng 重组 HSD17B3 蛋白, 37°C 反应。
标准反应体系 (氧化反应方向): 50 mM 甘氨酸-NaOH 缓冲液 (pH 9.5), 2 mM NADP⁺, 50 µM 睾酮, 25-50 ng 重组 HSD17B3 蛋白, 37°C 反应。
比活性: ≥ 50 nmol/min/mg 蛋白 (在标准还原反应条件下,以雄烯二酮为底物)。
Km 值: 对于雄烯二酮 ≈ 2.5 µM;对于 NADPH ≈ 15 µM (仅供参考,具体值因实验条件而异)。
重组蛋白应用
适用于:
酶动力学研究: 测定底物特异性、抑制剂筛选和动力学参数。
药物筛选与开发: 作为靶点,用于筛选调节睾酮合成的激动剂或抑制剂(如用于前列腺癌、多囊卵巢综合征等疾病的研究)。
抗体生产与验证: 作为免疫原或标准品,用于开发高特异性的抗体。
诊断开发: 作为标准品,用于建立检测活性或含量的临床或科研检测方法。
性发育障碍研究: 用于研究突变对其酶活性和结构的影响。
代谢组学研究: 体外重构类固醇激素合成途径。
使用说明
解冻: 快速在 37°C 水浴中解冻,或置于冰上缓慢解冻。解冻后请短暂离心收集管壁液体。
稀释: 根据实验需要在冰上用合适的缓冲液(推荐使用存储缓冲液或反应缓冲液)进行稀释。避免反复冻融,建议使用前分装。
活性实验: 请使用前在反应缓冲液中预孵育蛋白 5 分钟。建议设立不含底物或含有特异性抑制剂(如表睾酮)的阴性对照。
储存: 长期储存于 -80°C。稀释后的蛋白溶液建议在4°C保存并于当天使用。
质量控制
纯度: SDS-PAGE (考马斯亮蓝染色) 显示纯度 >95%。
内毒素: < 1.0 EU/µg (LAL 法测定)。
生物活性: 如第三部分所述,经功能活性实验验证。
一致性: 通过 Western Blot 使用抗-His标签抗体进行验证。
注意事项与免责声明
安全警告: 本品仅供科研使用,不适用于人体或临床诊断。
操作: 实验时请遵守实验室安全规程,穿戴合适的个人防护装备。
稳定性: 避免反复冻融(>3次),否则可能导致活性下降。
优化: 由于实验条件(缓冲液、pH、温度、底物浓度等)的差异,用户可能需要对使用量进行优化。
特异性: 该酶也可能作用于其他底物,实验设计时需考虑其底物谱。
免责声明: 本产品在正确储存和处理条件下保证其规格符合所述。由于用户使用条件超出我们控制范围而导致的结果差异,供方不承担责任。建议用户根据特定应用验证产品性能。
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