按品牌选择
 |
|
|||||||||||||||||||||||||||||
| [发表评论] [本类其他产品] [本类其他供应商] [收藏] | ||||||||||||||||||||||||||||||
| 销售商： 上海谷研实业有限公司 | 查看该公司所有产品 >> |
产品描述
碘甲腺原氨酸脱碘酶Ⅱ是一种膜结合蛋白，能够将甲状腺素（T4）转化为活性更高的三碘甲状腺原氨酸（T3），参与甲状腺激素的代谢和调节，对维持机体的能量代谢、生长发育和神经系统功能等具有重要作用。该重组蛋白多以哺乳动物细胞为表达宿主，经过纯化后具有天然的酶学特性，可用于甲状腺激素代谢研究、甲状腺疾病的发病机制探讨以及作为阳性对照用于酶活性检测实验，需在-80℃低温保存，避免反复冻融。
| 产品名称 |
碘甲腺原氨酸脱碘酶Ⅱ(DIO2)重组蛋白 |
物种 | MRattus norvegicus (Rat，大鼠) |
| 型号 | GOY-01D674 | 来源 | 原核表达 |
| 预测分子量 | 72.4kDa | 实际分子量 | 60kDa(差异分析请参阅说明书) |
商品详情
产品名称：碘甲腺原氨酸脱碘酶Ⅱ(DIO2)重组蛋白
物种：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)
英文名称：Recombinant Deiodinase, Iodothyronine, Type II (DIO2)
5DII; D2; SelY; TXDI2; Thyroxine Deiodinase,Type II; Type-II 5'-deiodinase
型号：GOY-01D674
酶与激酶
物种：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)
来源：原核表达
宿主E.coli
内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位：：细胞膜
预测分子量：72.4kDa
实际分子量：60kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签：Ser30~Phe259 with Two N-terminal Tags, His-tag and MBP-tag
缓冲液成份：磷酸盐缓冲液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）
性状：冻干粉
纯度：> 97%
等电点：5.8
应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格10μg50μg200μg1mg5mg
重组蛋白实验核心流程
重组蛋白实验本质是通过基因工程技术，让宿主细胞表达目标蛋白，再经过分离纯化得到可用的蛋白，核心流程分为5个关键步骤：
1. 目的基因的获取与优化
基因来源：可以从cDNA文库中PCR扩增、人工合成，或者从基因组DNA中克隆（针对原核生物）
密码子优化：根据宿主细胞（如大肠杆菌、CHO细胞）的密码子偏好性优化基因序列，提升蛋白表达量
关键元件添加：在基因两端添加酶切位点、标签序列（His-tag、GST-tag）、信号肽等，方便后续克隆、表达和纯化
2. 重组表达载体构建
载体选择：根据宿主类型选择对应的载体，原核常用pET、pGEX系列；真核常用pcDNA、pPICZ系列
克隆方法：通过限制性内切酶酶切+连接酶连接，或同源重组、Gateway克隆等方法，将目的基因插入载体
载体验证：通过菌落PCR、酶切鉴定和DNA测序，确认重组载体构建成功
3. 宿主细胞转化/转染
原核宿主：常用大肠杆菌BL21(DE3)，通过热激法或电穿孔法将重组质粒导入细胞
真核宿主：分为哺乳动物细胞（CHO、HEK293）、酵母（毕赤酵母、酿酒酵母）、昆虫细胞等，采用脂质体转染、电转、病毒感染等方法
阳性筛选：利用载体上的抗性基因（如氨苄青霉素、新霉素）筛选成功导入重组载体的细胞
4. 重组蛋白诱导表达
原核表达诱导：常用IPTG诱导lac启动子，控制诱导温度（16-37℃）、IPTG浓度（0.1-1mM）和诱导时间（4-24h），优化表达条件
真核表达诱导：哺乳动物细胞常用瞬时表达或稳定表达系；酵母常用甲醇诱导AOX启动子；昆虫细胞通过病毒感染后表达
表达形式判断：通过SDS-PAGE和Western Blot检测蛋白表达，判断是可溶性表达还是包涵体表达
5. 重组蛋白分离纯化
包涵体处理：如果形成包涵体，需要先裂解细胞，收集包涵体，再通过变性、复性获得有活性的蛋白
可溶性蛋白纯化：利用标签序列进行亲和层析（Ni-NTA亲和柱纯化His-tag蛋白），再通过离子交换层析、凝胶过滤层析等方法进一步纯化
蛋白鉴定：通过SDS-PAGE、Western Blot、质谱分析等方法验证蛋白的纯度和正确性
活性检测：根据蛋白的功能特性，选择对应的活性检测方法（如酶活测定、ELISA、细胞实验等）
应用范围
免疫学研究：作为阳性对照或免疫原用于抗体生产。
分子检测：Western Blot（WB）、SDS-PAGE分析。
功能研究：参与糖酵解途径、肿瘤免疫调控等机制研究。
检测方法
Lowry法：碱性条件下与铜离子反应生成络合物，750nm比色定量。
SDS-PAGE：考马斯亮蓝染色验证分子量及纯度。
注意事项
溶解建议：使用无菌PBS或去离子水复溶，避免剧烈震荡。
实验用途：仅限科研，不适用于临床诊断或治疗。
公司正在出售的产品
公司正在出售的产品
| 大鼠N-乙酰转移酶5(NAT5)重组蛋白 | 轴蛋白1封闭多肽 |
| 小鼠丝氨酰tRNA合成酶2(SARS2)重组蛋白 | 钾离子通道蛋白6封闭多肽 |
| 小鼠肌强直性营养不良蛋白激酶(DMPK)重组蛋白 | 分泌型白细胞蛋白酶抑制因子封闭多肽 |
| 大鼠异亮氨酰tRNA合成酶2(IARS2)重组蛋白 | 磷酸二酯酶7B封闭多肽 |
| 人过氧化物酶体生物合成因子26(PEX26)重组蛋白 | β1-6 N-乙酰氨基葡萄糖转移酶7封闭多肽 |
| 人ATP酶13A3(ATP13A3)重组蛋白 | 死亡相关蛋白6/Fas死亡区相关蛋白封闭多肽 |
| 大鼠肌球蛋白ⅤA(MYO5A)重组蛋白 | 磷酸化视网膜母细胞瘤相关蛋白p130封闭多肽 |
| 小鼠酸性磷酸酶1(ACP1)重组蛋白 | 含SH2结构域蛋白D5封闭多肽 |
| 人蛋白酶体亚基α6(PSMa6)重组蛋白 | 8号染色体开放阅读框45封闭多肽 |
| 人泛素结合酶E2C结合蛋白E2D1(UBE2D1)重组蛋白 | Ki67蛋白封闭多肽 |
| 人单氨氧化酶B(MAOB)重组蛋白 | 干扰素α2封闭多肽 |
| 大鼠N-酰基鞘氨醇酰胺水解酶2(ASAH2)重组蛋白 | 磷酸化周期素依赖激酶2封闭多肽 |
| 大鼠透明质酸合酶1(HAS1)真核蛋白 | 碘甲腺原氨酸脱碘酶Ⅱ(DIO2)重组蛋白DNAJB8蛋白封闭多肽 |
| 小鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)真核蛋白 | 氢离子转运ATP合成酶A1封闭多肽 |
| 人羧酸酯酶2(CES2)真核蛋白 | 晚期糖基化终末产物AGEs蛋白 |
Copyright(C) 1998-2026 生物器材网 电话：021-64166852;13621656896 E-mail：info@bio-equip.com