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人脑啡肽(ENK)ELISA试剂盒

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销售商：上海研生实业有限公司

产品概述：

人脑啡肽（ENK, Enkephalin）ELISA试剂盒是一种用于体外定量检测人血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清等样本中脑啡肽含量的科研工具。脑啡肽作为一种内源性阿片样多肽，在痛觉调节、情绪控制及神经内分泌中起重要作用。

以下基于通用ELISA操作规范及多品牌试剂盒信息，为您整理的详细操作与解析指南。

🧪 检测原理.

试剂盒主要采用双抗体夹心法原理：

包被：酶标板微孔中预先包被了高亲和力的抗人ENK单克隆抗体。

结合：向微孔中加入标准品或待测样本，样本中的ENK与固相抗体结合。

酶联：加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体，与已结合的ENK形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”复合物。

显色：加入TMB底物液，HRP催化底物产生蓝色显色反应。

终止与读数：加入终止液（硫酸）使反应终止，溶液颜色由蓝色转变为黄色。在酶标仪450nm波长处测定吸光度（OD值）。OD值的大小与样本中ENK的浓度呈正相关。

标准操作流程 (SOP).

1. 实验前准备

试剂平衡：从冰箱取出试剂盒，在室温（20-25℃）下平衡20-30分钟。

配液：将浓缩洗涤液（如20×）用蒸馏水稀释至1×工作浓度。若洗涤液有结晶，需水浴加热溶解。

标准品复溶：将冻干标准品按说明书要求复溶并进行梯度稀释（如0、1.5、3、6、12、24 pg/mL）。

2. 加样

设置孔位：设置空白孔（调零用）、标准品孔（不同浓度梯度）、样本孔。

加样操作：每孔加入50-100μL标准品或待测样本。

3. 温育与洗涤

温育：用封板膜封住板孔，37℃恒温箱温育30-60分钟。

洗涤：弃去孔内液体，甩干，每孔注满洗涤液，静置1分钟后弃去，拍干。重复此过程5次。

4. 加酶标试剂

加酶：除空白孔外，每孔加入酶标试剂（HRP标记抗体）50-100μL。

温育：37℃避光温育30-60分钟。

洗涤：再次洗板5次，拍干。

5. 显色与终止

显色：每孔加入显色剂A液和B液各50μL，37℃避光显色10-15分钟。

终止：每孔加入50μL终止液，此时溶液颜色由蓝变黄。

应用与背景.

脑啡肽（ENK）是一种内源性阿片肽，主要包括甲硫氨酸脑啡肽和亮氨酸脑啡肽。

生物学功能：主要在中枢和外周神经系统中发挥镇痛、抗抑郁、调节情绪和应激反应的作用。

科研应用：用于研究疼痛机制、阿片类药物成瘾、抑郁症、神经退行性疾病以及免疫调节等领域的研究。"

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