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| 销售商： 上海研生实业有限公司 | 查看该公司所有产品 >> |
产品概述：
以下我为你整理的详细操作与原理解析：
公司正在出售的产品：
人免疫核糖核酸（Irna）ELISA试剂盒是一种用于体外定量检测人血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中免疫核糖核酸（Irna）含量的科研工具。它基于酶联免疫吸附试验（ELISA）技术，具有高灵敏度和特异性。
| 产品名称 | 人免疫核糖核酸(Irna)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Irna ELISA Kit |
| 规格 | 48T/96T | 货号 | Y-E2653 |
| 保存 | 2-8℃ | 用途 | 仅供科研 |
🧪 检测原理.
该试剂盒通常采用双抗体夹心法（Sandwich ELISA）。
包被： 酶标板微孔中预先包被有纯化的抗人免疫核糖核酸（Irna）抗体。
结合： 加入待测样本后，样本中的Irna抗原与孔壁上的抗体结合。
检测： 加入酶标记（通常为HRP辣根过氧化物酶）的检测抗体，形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”的夹心复合物。
显色： 洗涤后加入底物TMB，酶催化底物产生颜色反应（蓝色），加入终止液后变为黄色。
定量： 颜色深浅与样本中Irna浓度呈正比，在酶标仪450nm波长下测定OD值，计算浓度。
主要组成成分.
不同品牌的试剂盒细节略有差异，但核心组分基本一致：
组分名称 规格示例 (96T) 保存条件 主要用途
酶标板 96孔 (12孔×8条) 2-8℃干燥 预包被抗-Irna抗体。
标准品 0.5mL×1瓶 (48ng/ml) -20℃ 用于制作标准曲线。
酶标试剂 6mL×1瓶 2-8℃ HRP标记的抗-Irna抗体。
标准品稀释液 1.5mL×1瓶 2-8℃ 稀释标准品。
样品稀释液 6mL×1瓶 2-8℃ 稀释待测样本。
显色剂 A/B 各6mL×1瓶 2-8℃ (避光) TMB底物溶液。
终止液 6mL×1瓶 常温 2M 硫酸溶液，终止反应。
浓缩洗涤液 20mL×1瓶 (30×) 常温 使用前需用蒸馏水稀释。
标准操作流程 (SOP).
平衡与配液：
试剂盒从冰箱取出，在室温（18-25℃）平衡15-30分钟。
将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水稀释30倍备用（如有结晶，可水浴加热溶解）。
标准品稀释：
按说明书进行倍比稀释（例如：48ng/ml → 24ng/ml → 12ng/ml...），制成标准曲线梯度。
加样：
标准孔：加入不同浓度的标准品（50μL）。
样本孔：先加样品稀释液40μL，再加待测样本10μL（终稀释度为5倍）。
空白孔：不加样本和酶标试剂。
温育：
用封板膜封板，37℃温育30分钟。
洗板：
弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，重复5次，拍干。
加酶与洗板：
每孔加入酶标试剂50μL（空白孔除外），37℃温育30分钟。
重复洗板步骤5次。
显色与终止：
每孔加入显色剂A和B各50μL，37℃避光显色15分钟。
每孔加入终止液50μL，轻轻震荡混匀，颜色由蓝变黄。
测定：
在15分钟内，使用酶标仪在450nm波长下测定各孔的OD值。
结果计算.
绘制标准曲线：以标准品浓度为横坐标（X），对应的平均OD值为纵坐标（Y），绘制曲线并计算直线回归方程。
计算浓度：将样本的OD值代入方程，计算出样本中Irna的浓度。
稀释倍数：将计算出的浓度乘以稀释倍数（本操作中为5倍），即为样本中Irna的实际浓度。"
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