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| 销售商： 上海研生实业有限公司 | 查看该公司所有产品 >> |
产品概述：
| 产品名称 | 人免疫反应性生长激素(irGH)ELISA试剂盒 | 英文名称 | irGH Elisa Kit |
| 规格 | 48T/96T | 货号 | Y-E655 |
| 保存 | 2-8℃ | 用途 | 仅供科研 |
以下是对该试剂盒的详细解析：
⚙️ 检测原理
人irGH ELISA试剂盒普遍采用双抗体夹心法（Sandwich ELISA）。
包被： 酶标板微孔中预先包被了抗人生长激素（hGH）的特异性捕获抗体。
加样与结合： 加入待测样本后，样本中的irGH抗原与固相抗体结合。
酶标抗体结合： 加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体（抗-hGH-HRP），形成“捕获抗体-irGH-酶标抗体”的夹心复合物。
显色与终止： 加入底物TMB显色（蓝色），随后加入终止液（通常为硫酸），反应终止并变为黄色。
检测： 在酶标仪450nm波长下测定吸光度（OD值）。样本中irGH的浓度与OD值呈正相关，通过标准曲线计算浓度。
典型性能参数
不同品牌试剂盒参数略有差异，以下为常见参考值：
参数项 描述
检测范围 通常为 0.5 - 40 ng/mL 或更高（视具体试剂盒而定）
灵敏度 最低检测浓度通常 < 0.5 ng/mL 或更低
特异性 识别天然和重组人GH，不与其它细胞因子（如催乳素）明显交叉反应
重复性 板内/板间变异系数（CV%）通常 < 10%-15%
样本类型 血清、血浆（EDTA/肝素）、细胞培养上清、组织匀浆等
操作步骤
平衡： 试剂盒从2-8℃取出，室温（20-25℃）平衡15-30分钟。
配液： 配制洗涤液（如20×或30×浓缩液稀释为1×）。
加样： 设置标准品孔（梯度稀释）和样本孔，建议做复孔。加入样本后，37℃温育60分钟。
洗板： 弃液，洗涤液注满每孔，静置1分钟后弃去，重复5次，拍干。
加酶： 每孔加入酶标试剂（HRP标记抗体），37℃温育30-60分钟。
显色： 加入底物A、B液，37℃避光显色10-15分钟。
终止与读数： 加入终止液，15分钟内于450nm测定OD值，计算浓度。
样本处理与要求
血清： 室温静置10-20分钟凝固，离心取上清。避免溶血。
血浆： 使用EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，采集后立即离心。
保存： 样本若不立即检测，可分装后冻存于-20℃（短期）或-80℃（长期），避免反复冻融。
注意事项： 某些试剂盒说明书中特别指出，（）会抑制HRP活性，因此样本中不能含有NaN。
注意事项
温育条件： 必须严格控制温育时间（通常为30-60分钟）和温度（37℃），以保证抗原抗体反应的充分性。
洗板质量： 洗板不彻底是导致背景高和数据偏差的主要原因，需确保洗涤干净且孔内液体被完全拍干。
试剂混匀： 所有液体组分在使用前需充分混匀，但避免产生剧烈气泡。
底物避光： TMB底物液对光敏感，显色步骤需避光进行。
安全防护： 终止液通常为强酸，具有腐蚀性；TMB底物具有一定毒性，操作时请穿戴实验服、手套和护目镜。"
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