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| 销售商： 上海研生实业有限公司 | 查看该公司所有产品 >> |
产品概述：
人绿脓杆菌外毒素A（PEA）ELISA试剂盒是一种用于体外定量检测人血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆等生物样本中绿脓杆菌外毒素A（Pseudomonas Exotoxin A, PEA）含量的科研工具。
公司正在出售的产品：
| 产品名称 | 人绿脓杆菌外毒素A(PEA)ELISA试剂盒 | 英文名称 | PEA Elisa Kit |
| 规格 | 48T/96T | 货号 | Y-E541 |
| 保存 | 2-8℃ | 用途 | 仅供科研 |
以下我为你整理的详细操作与原理解析：
🧪 检测原理.
该试剂盒通常采用双抗体夹心法（Sandwich ELISA）。
包被： 酶标板微孔中预先包被有抗人PEA的特异性捕获抗体。
结合： 加入待测样本后，样本中的PEA抗原与孔壁上的抗体结合。
检测： 加入酶标记（通常为HRP辣根过氧化物酶）的检测抗体，形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”的夹心复合物。
显色： 洗涤后加入底物TMB，酶催化底物产生颜色反应（蓝色），加入终止液后变为黄色。
定量： 颜色深浅与样本中PEA浓度呈正比，在酶标仪450nm波长下测定OD值，计算浓度。
主要组成成分.
不同品牌的试剂盒细节略有差异，但核心组分基本一致：
组分名称 规格示例 (96T) 保存条件 主要用途
酶标板 96孔 (8孔×12条) 2-8℃ 预包被PEA捕获抗体。
标准品 冻干粉或液体 -20℃或2-8℃ 用于制作标准曲线。
酶标试剂 6mL-10mL 2-8℃ HRP标记的抗PEA抗体。
标准品稀释液 1.5mL×1瓶 2-8℃ 溶解和稀释标准品。
样品稀释液 6mL×1瓶 2-8℃ 稀释高浓度样本。
显色剂 A/B 各6mL×1瓶 2-8℃ (避光) TMB底物溶液。
终止液 6mL×1瓶 常温 2M 硫酸溶液，终止反应。
浓缩洗涤液 25mL×1瓶 (20×) 常温 使用前需用蒸馏水稀释。
标准操作流程 (SOP).
平衡与配液：
试剂盒从冰箱取出，在室温（18-25℃）平衡15-30分钟。
按说明书比例稀释浓缩洗涤液（如20×洗涤液 + 19份蒸馏水）。
标准品稀释：
按说明书图表进行倍比稀释（例如：180 ng/L → 120 ng/L → 60 ng/L...），制成标准曲线梯度。
加样：
标准孔：加入不同浓度的标准品（通常50-100μL）。
样本孔：加入待测样本（通常50-100μL）。
空白孔：不加样本，只加显色剂（作为空白对照）。
温育：
用封板膜封板，37℃温育30-60分钟。
洗板：
弃去孔内液体，吸水纸上拍干。
每孔注满洗涤液，静置30秒-1分钟，甩去洗涤液，拍干。重复5次。
加酶与洗板：.
每孔加入酶标试剂（空白孔除外），37℃温育30-60分钟。
重复洗板步骤5次。
显色与终止：
每孔加入显色剂A和B各50μL，37℃避光显色10-15分钟。
每孔加入终止液50μL，轻轻震荡混匀，颜色由蓝变黄。
测定：
在15分钟内，使用酶标仪在450nm波长下测定各孔的OD值。"
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