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人卵清蛋白特异性IgG(OVA sIgG)试剂盒

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销售商：上海研生实业有限公司

产品概述：

人卵清蛋白特异性IgG（OVA sIgG）ELISA试剂盒是一种用于体外定量检测生物样本中抗卵清蛋白特异性IgG抗体浓度的科研工具。卵清蛋白（Ovalbumin, OVA）不仅是鸡蛋清中的主要蛋白质，也是免疫学研究中广泛使用的模式抗原，常用于构建过敏反应、哮喘及免疫耐受等动物模型。

以下是对该试剂盒的详细解析：

⚙️ 检测原理.

人OVA sIgG ELISA试剂盒通常采用间接法（Indirect ELISA）或夹心法（Sandwich ELISA）原理。

间接法原理（常见）：

包被：酶标板微孔中预先包被了卵清蛋白（OVA）抗原。

孵育：加入待测样本（如血清）后，样本中特异性的IgG抗体会与固相载体上的OVA抗原结合。

酶标抗体结合：加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的二抗（如抗人IgG-HRP），该二抗能特异性识别并结合人IgG。

显色与检测：加入底物（TMB）显色，终止反应后在450nm波长下测定吸光度（OD值）。样本中OVA sIgG的浓度与OD值呈正相关。

操作步骤.

试剂平衡：将试剂盒从冷藏环境取出，在室温（20-25℃）下平衡20分钟。

配置洗涤液：按说明书要求用蒸馏水或去离子水稀释浓缩洗涤液（如20×洗涤缓冲液稀释为1×）。

加样：设定标准品孔和样本孔。标准品通常进行倍比稀释以绘制标准曲线，样本建议做复孔。向样本孔中加入适量体积的待测样本（如50-100μL）。

温育：封板后，在37℃恒温箱中温育一定时间（通常为30-60分钟）。

洗板：弃去孔内液体，用洗涤液注满每孔后静置（约30-60秒），甩干，重复洗涤3-5次，最后在吸水纸上拍干。

加酶标试剂：每孔加入HRP标记的检测抗体（如抗人IgG-HRP），37℃避光温育30-60分钟。

再次洗板：重复步骤5的洗涤过程。

显色与终止：每孔加入底物A液和B液（TMB），避光显色15分钟，然后加入终止液（通常为硫酸溶液）终止反应。

读数与计算：在15分钟内于450nm波长下测定OD值，根据标准品浓度绘制标准曲线，计算样本中OVA sIgG的浓度。

样本处理与要求.

适用样本：主要用于检测血清和血浆（EDTA或肝素抗凝），也可用于细胞培养上清或组织匀浆。

样本处理：

血清：全血标本室温静置2小时或4℃过夜，离心取上清。

血浆：采集后30分钟内离心取上清。

注意事项：样本应避免溶血，且不宜反复冻融。若样本中抗体浓度过高，需用样本稀释液进行适当稀释后再检测。

注意事项

严格温育：必须严格按照说明书规定的时间和温度（通常是37℃）进行温育，以保证抗原抗体反应的充分性。

洗板规范：洗板不彻底是导致背景高和数据偏差的主要原因，需确保洗涤干净且孔内液体被完全拍干。

试剂混匀：所有液体组分（特别是洗涤液和酶标试剂）在使用前需充分混匀。

避免污染：使用一次性吸头，防止交叉污染。

安全防护：终止液具有腐蚀性，显色底物可能有毒性，操作时请穿戴实验服和手套。"

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