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人卵泡抑素(FS)ELISA试剂盒

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销售商：上海研生实业有限公司

产品概述：

人卵泡抑素（Follistatin, FS）ELISA试剂盒是一种用于体外定量检测人血清、血浆、细胞培养上清液等生物样本中卵泡抑素（FS）蛋白浓度的科研工具。

以下基于通用的ELISA操作规范及多品牌试剂盒信息，为您整理的详细操作与解析指南。

🧪 检测原理

试剂盒主要采用双抗体夹心法原理：

包被：酶标板微孔中已预先包被了抗人Follistatin的特异性单克隆抗体。

结合：向微孔中加入样本（或标准品），样本中的FS与固相抗体结合。

检测：加入生物素标记的抗人Follistatin检测抗体，形成“固相抗体-FS-生物素化抗体”的夹心复合物。

酶联：加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素，它会与生物素特异性结合。

显色：加入TMB底物液，HRP催化底物显色（蓝色）。

终止与读数：加入终止液（硫酸）终止反应（溶液变黄），在450nm波长处测定吸光度（OD值）。OD值与样本中FS的浓度成正比。

标准操作流程 (SOP)

1. 实验前准备

试剂平衡：从冰箱取出试剂盒，在室温（20-25℃）下平衡30-60分钟。

配液：将浓缩洗涤液（如20×）用蒸馏水稀释至1×工作浓度。

标准品复溶：将冻干标准品加入指定体积的稀释液溶解，配制成原液后，再进行倍比稀释以制作标准曲线。

2. 加样

设置孔位：设置空白孔（只加稀释液）、标准品孔（不同浓度梯度）、样本孔。

加样量：通常每孔加入50μL-100μL的标准品或待测样本（具体体积依说明书而定）。

3. 温育与洗涤

温育：用封板膜封住板孔，37℃恒温箱温育30-60分钟。

洗涤：弃去孔内液体，甩干，每孔注满洗涤液，静置1分钟，弃去液体，拍干。重复此过程5次。

加检测抗体与酶标物

加检测抗体：除空白孔外，每孔加入生物素标记的检测抗体工作液（通常为100μL/孔），37℃温育60分钟。

洗涤：再次洗板5次。

加酶标试剂：每孔加入HRP标记的链霉亲和素工作液（通常为100μL/孔），37℃温育30-60分钟。

洗涤：最后洗板5次。

5. 显色与终止

显色：每孔加入TMB底物A液和B液各50μL（或混合液100μL），37℃避光显色10-15分钟。

终止：每孔加入50μL终止液，轻轻震荡混匀，此时蓝色溶液变为黄色。"

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