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人硫氧化还原蛋白(Trx)ELISA试剂盒

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销售商：上海研生实业有限公司

产品概述：

人硫氧化还原蛋白（Thioredoxin, Trx）ELISA试剂盒是一种用于体外定量检测生物样本中Trx蛋白浓度的科研工具。Trx是一种重要的氧化还原调节蛋白，在细胞抗氧化、DNA合成及信号转导中发挥关键作用。

以下是对该试剂盒的详细解析：

⚙️ 检测原理.

人Trx ELISA试剂盒通常采用双抗体夹心法（Sandwich ELISA）。

包被：酶标板微孔中预先包被了高亲和力的抗人Trx单克隆抗体。

加样与结合：加入含Trx抗原的样本（如血清、血浆）后，Trx与固相抗体结合。

酶标抗体结合：加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体，形成“捕获抗体-抗原-Trx-酶标抗体”的夹心复合物。

显色与终止：加入底物TMB显色，随后加入终止液终止反应。

检测：在酶标仪450nm波长下测定吸光度（OD值）。样本中Trx的浓度与OD值呈正相关。

典型性能参数.

不同品牌试剂盒参数略有差异，以下为常见参考值：

参数项典型数值/描述

检测范围约 46.88 pg/mL - 3000 pg/mL (或 4.688 ng/mL - 300 ng/mL)

灵敏度 < 23.44 pg/mL (最低检测限)

特异性识别重组人Trx，与其他细胞因子无交叉反应

重复性板内/板间变异系数（CV%）通常 < 10%

样本类型血清、血浆（EDTA/肝素）、组织匀浆、细胞培养上清

操作步骤.

平衡：所有试剂使用前需在室温（20-25℃）平衡30分钟。

配液：配制洗涤液（通常为1:20稀释）和标准品（倍比稀释）。

加样：分别加入标准品和待测样本，37℃温育1-2小时。

洗板：使用自动洗板机或手工洗板，去除未结合物质（通常洗3-5次）。

加酶与显色：依次加入生物素化抗体和酶结合物工作液，温育后显色。

读数：测定OD值，绘制标准曲线并计算样本浓度。

🧪 样本处理与保存

血清：室温凝固2小时或4℃过夜，离心取上清。立即分析或分装后-20℃保存。

血浆：采集后30分钟内离心取上清。

组织/细胞：制备匀浆或裂解液后离心取上清。

注意：避免溶血和反复冻融，以免蛋白降解导致结果偏差。

注意事项.

避免污染：使用一次性吸头，避免试剂和样本交叉污染。

防止干燥：温育过程中需密封酶标板，防止孔内液体挥发干燥。

洗板质量：洗板不彻底是导致误差的主要原因，确保吸干孔内液体。

底物避光： TMB底物液对光敏感，需避光保存和反应。

安全防护：终止液通常为酸性，显色液含潜在致癌物，操作时请穿戴防护装备。"

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