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| 销售商： 上海研生实业有限公司 | 查看该公司所有产品 >> |
产品概述：
检测原理
公司正在出售的产品：
| 产品名称 | 人硫酸角质素(KS)ELISA试剂盒 | 英文名称 | KS ELISA Kit |
| 规格 | 48T/96T | 货号 | Y-E2646 |
| 保存 | 2-8℃ | 用途 | 仅供科研 |
市面上的人硫酸角质素ELISA试剂盒通常采用双抗体夹心法（Sandwich ELISA）。
固相载体： 酶标板微孔中预先包被了抗人硫酸角质素的特异性捕获抗体。
结合反应： 向微孔中加入标准品（已知浓度的KS）或待测样本，以及酶标检测抗体（通常为HRP标记的辣根过氧化物酶抗体）。
夹心形成： 样本中的KS会同时与固相抗体和酶标抗体结合，形成“固相抗体-抗原-KS-酶标抗体”的夹心复合物。
显色与定量： 洗涤去除未结合物质后，加入底物TMB显色。酶催化底物产生蓝色，并在加入终止液后变为黄色。颜色的深浅与样本中KS的含量呈正相关。
主要组成成分.
不同品牌的试剂盒细节可能略有差异，但核心组分基本一致：
组分名称 规格示例 主要用途
酶标板 96孔/48孔 预包被抗体，用于固定抗原。
标准品 冻干粉或液体 用于制作标准曲线，确定样品浓度。
酶标试剂 6mL×1瓶 HRP标记的检测抗体，用于显色反应。
标准品稀释液 1.5mL×1瓶 用于溶解和稀释标准品。
样品稀释液 6mL×1瓶 用于稀释待测样本（如血清、血浆）。
显色剂 A/B 各6mL 底物溶液，酶催化后产生颜色变化。
终止液 6mL×1瓶 硫酸溶液，终止反应，使颜色由蓝变黄。
浓缩洗涤液 20mL×1瓶 使用前需用蒸馏水稀释（如30倍）后使用。
标准操作流程 (SOP).
试剂准备：
将试剂盒从冰箱取出，平衡至室温（约20-30分钟）。
按说明书比例稀释浓缩洗涤液（例如30倍浓缩液用蒸馏水稀释）。
标准品稀释：
按说明书图表进行倍比稀释（例如：800ng/L → 400ng/L → 200ng/L...），制成标准曲线梯度。
加样：
标准孔：加入不同浓度的标准品（通常50μL）。
样本孔：先加样品稀释液（40μL），再加待测样本（10μL），混匀。
空白孔：不加样品和酶标试剂（仅作为空白对照）。
温育与洗涤：
一抗温育：37℃温育30-60分钟。
洗板：弃去液体，拍干，注满洗涤液，静置30秒-1分钟，重复5次，彻底拍干。
加酶与洗涤：
每孔加入酶标试剂（50-100μL，空白孔除外），37℃温育30-60分钟。
重复洗涤步骤5次。
显色与终止：
每孔加入显色剂A和B各50μL，37℃避光显色10-15分钟。
每孔加入终止液50μL，轻轻震荡混匀，此时颜色由蓝变黄。
测定：
在15分钟内，使用酶标仪在450nm波长下测定各孔的吸光度（OD值）。"
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