
细胞简介:
成纤维细胞是肺间质中含量丰富的细胞种类。这些成纤维细胞与普通的相似,但也有其的特征,例如具有很长的伪足和细胞间的间隙连接。
肺成纤维细胞的主要功能为分泌肺泡隔基质中的 III型胶原,弹性蛋白以及蛋白多糖,也在肺部受损时担任重要的修复和重建功能。肺部受伤后,在炎症部位的一定程度的成纤维细胞积聚是肺部复原的关键步骤,过多或者不足的成纤维细胞聚集都会导致肺功能异常。
细胞特性:
1)组织来源于实验动物的正常肺组织。
2)细胞鉴定:纤维连接蛋白(Fibronectin)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:长梭状细胞,贴壁培养。
我们推荐使用 DELF 原代 成纤维 细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
操作步骤:
● 取材:严格进行动物皮肤消毒,使用无菌器械取材,将组织从机体取出后,用Hank’s液洗涤三次,并剔除脂肪、结缔组织、血液等杂物。
● 分离:根据组织类型选择合适的酶(如胰蛋白酶、胶原酶等)或机械方法将组织分散成单个细胞。
● 计数与接种:用血球计数板对细胞进行计数,将细胞调整到合适的密度(如5×10⁵/ml左右),转移至培养瓶中进行培养。
● 培养:置于合适的培养容器中,在无菌、适当温度(一般为37℃)和一定条件(如5%CO₂)下,使之生存、生长和繁殖。
细胞纯化方法
● 机械分离法:利用物理方法(如切割、刮除)分离目标细胞,适用于组织块较大、细胞分布不均的情况。
● 酶消化法:使用胰蛋白酶、胶原酶等酶类消化组织,广泛用于贴壁细胞、纤维化组织、肿瘤组织等的分离。
● 差速贴壁分离法:利用不同种类细胞贴壁速度差异性,通过控制培养时间差或消化时间差,选择性移除未贴壁或弱贴壁的细胞。
● 化学试剂抑制法:利用某些化学物质对特定细胞生长的抑制作用,如阿糖胞苷可抑制成纤维细胞生长,从而获得纯度较高的目标细胞。
● 密度梯度离心法:利用不同细胞类型的密度差异,通过离心分层,适用于血液细胞等单细胞悬液的分离。
公司正在出售的产品:
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跨膜蛋白132A抗体 |
| 细胞半胱-6(CASPASE-6)活性比色法定量检测试剂盒 |
TIGAR蛋白抗体 |
| 细胞CDK2/CYCLIN E激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) |
G蛋白偶联受体172B抗体 |
| 非蛋白/游离巯基含量比色法定量检测试剂盒 |
丝裂原活化蛋白激酶MAP4K5抗体 |
| 组织HHV6-B(HUMAN HERPESVIRUS 6-B)病毒 |
DNA损伤自噬调整蛋白抗体 |
| 简单细菌酚品红染色试剂盒 |
DNA甲基转移酶-1(DNMT-1)活性酶连续循环比色法 |
| 回肠脂肪酸结合蛋白抗体 |
石蜡切片组织CASPASE-6蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 |
| Pacific Blue标记小鼠CD11c单克隆抗体 |
冰冻切片组织PDGF-B蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 |
| 富含亮氨酸重复跨膜神经元蛋白4抗体 |
细胞磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPCase)活性 |
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猪肺成纤维细胞活体组织氧化应激活性氧(ROS)荧光测定试剂盒(过氧亚硝基阴离子) |
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GST融合蛋白同位素([γ32P]GTP)激酶标记试剂盒 |
| 4号染色体开放阅读框28抗体 |
人k轻链单克隆抗体 |
注意事项:
无菌操作:实验过程中需严格遵循无菌操作规范
消化时间:消化时间不宜过长,以免细胞损伤
培养基更换:每隔3天换液一次,避免培养基污染
细胞鉴定:通过显微镜观察细胞形态,确保实验结果的准确性