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| 销售商： 上海联祖生物科技有限公司 | 查看该公司所有产品 >> |
商品属性:
| 产品名称 | 小鼠皮下微血管内皮细胞 | 英文名称 | Mouse primary subcutaneous microvascular endothelial cells |
| 组织来源 | 皮肤组织 | 默认种属 | 小鼠 |
| 产品规格 | 5×10^5Cells/T25 | 货号 | LZ-YX10222 |
| 运输保存 | 常温 | 用途 | 仅供科研实验 |
1）组织来源于实验动物的正常皮肤组织。
2)细胞鉴定：血管假性血友病因子（vWF）荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式：铺路石状细胞，不规则细胞，贴壁培养。
我们推荐使用 Delf原代内皮细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
2)细胞鉴定：血管假性血友病因子（vWF）荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式：铺路石状细胞，不规则细胞，贴壁培养。
我们推荐使用 Delf原代内皮细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
细胞简介：
微血管内皮细胞受损已被视为创伤、感染、休克、肿瘤、血管等多种和综合症发展的病理基础。一旦微血管内皮细胞受损，必然影响甚至破坏微血管内皮细胞正常的生物学功能，引起多种的发生。微血管内皮细胞间连接与血管通透性有着非常密切的关系。微血管内皮细胞合成与分泌前列环素、一氧化氮、内皮源性超极化因子和内皮素等物质，来维持血管的正常状态。
细胞传代流程
1. 观察与吸液 弃去旧培养基，用PBS缓冲液轻轻洗涤1-2次，去除残留血清。 血清会抑制胰酶活性，清洗步骤很重要。
2. 消化 加入适量预热的胰酶（如0.25% Trypsin-EDTA），覆盖瓶底即可。 EDTA 可以螯合钙镁离子，辅助消化。
3. 孵育与观察 放入37℃培养箱，显微镜下观察。待细胞变圆、间隙增大、轻拍瓶壁细胞脱落时，立即终止。 切勿消化过度，否则细胞膜受损，细胞会死。
4. 终止消化 迅速加入含血清的完全培养基，轻轻吹打混匀。血清能抑制胰酶活性。 吹打要轻柔，避免产生气泡损伤细胞。
5. 离心 将细胞悬液转移至离心管，1000 rpm（约120×g）离心3-5分钟。 离心是为了去除胰酶和死细胞碎片。
6. 重悬与分瓶 弃上清，加入新鲜完全培养基重悬细胞，按比例（如1:2, 1:3）接种到新瓶。
细胞的（冻存与复苏）：为了保证细胞的遗传稳定性，避免因传代过多而老化或变异，我们需要对细胞进行长期保存。
冻存（慢冻）：
使用含有DMSO（二甲基亚砜）和血清的冻存液。DMSO能防止细胞内结冰。标准流程通常是：4℃平衡 -> -80℃梯度降温 -> 转入液氮（-196℃）长期保存。
复苏（快融）：
从液氮中取出冻存管后，必须立即放入37℃水浴中快速融化。研究表明，缓慢解冻会导致冰晶重结晶，从而刺破细胞膜，导致细胞死亡。
避坑指南（关键技巧）
为了让你少走弯路，我总结了几个容易被忽视的细节：
防止污染：如果担心组织本身带有微生物，可以在清洗时用含双抗的溶液浸泡30分钟，或者在培养基中加入高浓度抗生素预培养24小时，之后再换正常培养基。
血清的作用：原代细胞培养通常需要更高比例的胎牛血清（如15%-20%），以提供更多的生长因子来支持细胞适应新环境。
成纤维细胞的干扰：很多组织（如肿瘤、皮肤）原代培养时，生长快的成纤维细胞往往会盖过上皮细胞。如果需要纯化上皮细胞，可能需要通过刮除法或差速贴壁法来去除成纤维细胞。
消化温度：胰酶在低温下活性低，操作时尽量保持试剂在冰上，只有消化时才放入37℃，以减少对细胞的非特异性损伤。
| RNA荧光（RiboGreen）定量检测试剂盒 | 跨膜蛋白9家族成员4抗体 |
| 体液二胺氧化酶（DAO）活性比色法定量检测试剂盒 | TRA2A蛋白抗体 |
| 细胞IRAK4激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C） | G蛋白偶联受体7抗体 |
| 维生素B3高效液相色谱法定量检测试剂盒 | 死亡效应结构域蛋白1抗体 |
| 细胞KSHV（KAPOSI SARCOMA-ASSOCIATED HERPESVIRUS）病毒定性检测试剂盒 | DRIM蛋白抗体 |
| 细菌铁型亚硝酸盐还原酶活性比色法定量检测试剂盒 | C. albicans RFLP基因分析试剂盒 |
| 肌动蛋白α3抗体 | CREB蛋白免疫共沉淀分析试剂盒 |
| PDZ结构域含环指蛋白4抗体 | BAX蛋白表达ELISA定量检测试剂盒 |
| 钙/钙调蛋白依赖性丝氨酸蛋白激酶抗体 | 细胞PDGFRβ激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C） |
| 肿瘤坏死因子配体超家族成员4抗体 | 小鼠皮下微血管内皮细胞植物组织胞浆超氧化物歧化酶（Cu/Zn SOD）分离试剂盒 |
| 血清学定义结肠癌抗原1抗体 | 3－甲基－2－苯并噻唑腙盐酸盐（3-methyl-2-benzothiazolinone hydrazone；MBTH） |
| 5-甲酰环连接酶抗体 | 神经细胞胞浆蛋白9.5/蛋白基因产物9.5单克隆抗体 |
● 无菌操作：自取材开始，保持所有组织细胞处于无菌条件，严格进行皮肤消毒和器械消毒，防止细菌、霉菌、支原体污染。
● 培养液与试剂：使用新鲜配制的消化酶溶液，注意培养液中营养成分的补充，如谷氨酰胺等，选择合适的胎牛血清。
● 培养条件：原代细胞在消化分离后，置于CO₂培养箱的头24-48h内，应处于绝对静置状态，避免频繁观察影响细胞贴壁。
手机版：小鼠皮下微血管内皮细胞
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