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| 销售商： 上海联祖生物科技有限公司 | 查看该公司所有产品 >> |
商品属性:
| 产品名称 | 小鼠颈动脉成纤维细胞 | 英文名称 | Mouse primary carotid artery fibroblasts |
| 组织来源 | 颈动脉组织 | 默认种属 | 小鼠 |
| 产品规格 | 5×10^5Cells/T25 | 货号 | LZ-YX10147 |
| 运输保存 | 常温 | 用途 | 仅供科研实验 |
1） 组织来源于实验动物的正常颈动脉组织。
2) 细胞鉴定：波形蛋白（Vimentin）荧光染色为阳性。
3) 经鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5) 细胞生长方式：长梭形细胞，不规则细胞，贴壁培养。
我们推荐使用 DELF原代成纤维细胞培养体系 作为该细胞的培养基。
2) 细胞鉴定：波形蛋白（Vimentin）荧光染色为阳性。
3) 经鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5) 细胞生长方式：长梭形细胞，不规则细胞，贴壁培养。
我们推荐使用 DELF原代成纤维细胞培养体系 作为该细胞的培养基。
细胞简介：
颈动脉存在于脊椎动物颈部的动脉。有颈外动脉和颈内动脉，前者分布至头顶部和颜面部，后者进入颅内分布至脑和眼眶内。主动脉是由内膜、中层弹力层和外膜构成，三层紧密贴合在一起。其中，外膜层主要由成纤维细胞构成。
细胞传代流程
1. 观察与吸液 弃去旧培养基，用PBS缓冲液轻轻洗涤1-2次，去除残留血清。 血清会抑制胰酶活性，清洗步骤很重要。
2. 消化 加入适量预热的胰酶（如0.25% Trypsin-EDTA），覆盖瓶底即可。 EDTA 可以螯合钙镁离子，辅助消化。
3. 孵育与观察 放入37℃培养箱，显微镜下观察。待细胞变圆、间隙增大、轻拍瓶壁细胞脱落时，立即终止。 切勿消化过度，否则细胞膜受损，细胞会死。
4. 终止消化 迅速加入含血清的完全培养基，轻轻吹打混匀。血清能抑制胰酶活性。 吹打要轻柔，避免产生气泡损伤细胞。
5. 离心 将细胞悬液转移至离心管，1000 rpm（约120×g）离心3-5分钟。 离心是为了去除胰酶和死细胞碎片。
6. 重悬与分瓶 弃上清，加入新鲜完全培养基重悬细胞，按比例（如1:2, 1:3）接种到新瓶。
细胞的（冻存与复苏）：为了保证细胞的遗传稳定性，避免因传代过多而老化或变异，我们需要对细胞进行长期保存。
冻存（慢冻）：
使用含有DMSO（二甲基亚砜）和血清的冻存液。DMSO能防止细胞内结冰。标准流程通常是：4℃平衡 -> -80℃梯度降温 -> 转入液氮（-196℃）长期保存。
复苏（快融）：
从液氮中取出冻存管后，必须立即放入37℃水浴中快速融化。研究表明，缓慢解冻会导致冰晶重结晶，从而刺破细胞膜，导致细胞死亡。
避坑指南（关键技巧）
为了让你少走弯路，我总结了几个容易被忽视的细节：
防止污染：如果担心组织本身带有微生物，可以在清洗时用含双抗的溶液浸泡30分钟，或者在培养基中加入高浓度抗生素预培养24小时，之后再换正常培养基。
血清的作用：原代细胞培养通常需要更高比例的胎牛血清（如15%-20%），以提供更多的生长因子来支持细胞适应新环境。
成纤维细胞的干扰：很多组织（如肿瘤、皮肤）原代培养时，生长快的成纤维细胞往往会盖过上皮细胞。如果需要纯化上皮细胞，可能需要通过刮除法或差速贴壁法来去除成纤维细胞。
消化温度：胰酶在低温下活性低，操作时尽量保持试剂在冰上，只有消化时才放入37℃，以减少对细胞的非特异性损伤。
| BCA蛋白质浓度定量试剂盒 | 跨膜蛋白SEMA4A抗体 |
| 细胞过氧化氢（HYDROGEN PEROXIDE）活性荧光定量检测试剂盒 | TRAP100蛋白抗体 |
| 细胞MAPKAP KINASE2激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C） | G蛋白偶联受体8抗体 |
| 植物维生素B1高效液相色谱法定量检测试剂盒 | 四分子交联体15抗体（四旋蛋白） |
| 体液HPV7（HUMAN PAPILLOMAVIRUS-7）病毒定性检测试剂盒 | Duffy血型趋化因子受体抗体 |
| 吸烟者人体肺组织微粒体组分（5毫克/毫升） | F. solani RFLP基因分析试剂盒 |
| 肌动蛋白结合蛋白3抗体 | 冰冻切片组织CREB蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 |
| PE-Cy5.5标记小鼠CD16/32单克隆抗体 | 细胞BCL2蛋白表达比色法定量检测试剂盒 |
| 钙反应因子抗体 | 细胞LYNB激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C） |
| 肿瘤坏死因子受体超家族成员27抗体 | 小鼠颈动脉成纤维细胞红细胞超氧化物歧化酶（SOD）亚型制备试剂盒 |
| 血小板白细胞C激酶底物2抗体 | 二苯基甲酰胺（diphenylformamide） |
| 5-羟色胺受体2B抗体 | 肾上腺素能受体β2重组兔单克隆抗体 |
● 无菌操作：自取材开始，保持所有组织细胞处于无菌条件，严格进行皮肤消毒和器械消毒，防止细菌、霉菌、支原体污染。
● 培养液与试剂：使用新鲜配制的消化酶溶液，注意培养液中营养成分的补充，如谷氨酰胺等，选择合适的胎牛血清。
● 培养条件：原代细胞在消化分离后，置于CO₂培养箱的头24-48h内，应处于绝对静置状态，避免频繁观察影响细胞贴壁。
手机版：小鼠颈动脉成纤维细胞
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