树突状细胞( Dendritic cells, DC)是机体功能强的专职抗原递呈细胞,它能高效地摄取、加工处理和递呈抗原,未成熟DC具有较强的迁移能力,成熟DC能有效激活初始型T细胞,处于启动、调控、并维持应答的中心环节。
DC的来源有两条途径:
①髓样干细胞在GM-CSF的刺激下分化为DC,称为髓样DC,也称DCl,与单核细胞和粒细胞有共同的前体细胞;包括朗格汉斯细胞,间皮(或真皮)DCs以及单核细胞衍生的DCs等。
| 产品名称 |
小鼠DC细胞 |
英文名称 |
Mouse primary DC cells |
| 组织来源 |
外周血组织 |
默认种属 |
小鼠 |
| 产品规格 |
5×10^5Cells/T25 |
货号 |
LZ-YX10238 |
②来源于样干细胞,称为样DC或浆细胞样DC,即DC2,与T细胞和NK细胞有共同的前体细胞。树突状细胞(DC)表面具有丰富的抗原递呈分子、共刺激因子和粘附因子,是功能强大的专职抗原递呈细胞(APC)。DC自身具有刺激能力,是目前发现的惟一能激活未致敏的初始型T细胞的APC。
细胞特性:

1)组织来源于实验动物的正常外周血组织。
2)细胞鉴定:CD11c荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:不规则细胞,半贴壁半悬浮培养。
我们推荐使用 DELF原代 树突状( DC) 细胞培养体系 作为该细胞的培养基。
1. 细胞复苏
原理 快速解冻减少冰晶损伤,保护细胞膜完整性。
步骤 冻存管→37℃水浴(1-2分钟)→移入预热培养基(5-6ml)→离心(1000rpm, 5分钟)→弃上清,重悬接种→次日换液。
2. 细胞传代
原理 胰蛋白酶消化细胞间及细胞与基质间的连接蛋白,使贴壁细胞脱落。
步骤
培养基预热(37℃)。
吸除旧培养基,PBS轻柔润洗。
加1ml 0.25%胰蛋白酶-EDTA,37℃孵育1-2分钟(显微镜下观察细胞间隙变大、细胞变圆时停止)。
加3-4ml完全培养基终止消化,轻吹打瓶壁使细胞脱落。
离心(1000-1200rpm, 3-5分钟)→弃上清,重悬接种(比例1:2至1:4)。
3. 细胞冻存
原理低温(-80℃至液氮)使细胞代谢停止,长期保存。
步骤
消化并离心收集细胞,弃上清。
加预冷冻存液(90% FBS + 10% DMSO或92% FBS + 8% DMSO),轻轻吹打均匀,细胞浓度约2-3×10⁶ cells/ml。
转移至冻存管,标记清楚。
程序冻存冻存管放入程序冻存盒,-80℃过夜,次日转入液氮长期保存。
无程序冻存盒时 冻存管先4℃静置5-10分钟,再-20℃静置2小时,最后-80℃过夜,次日入液氮。
细胞培养的核心:
无菌环境:这是首要条件。实验室通常使用超净工作台,通过过滤空气去除微生物。任何细菌、真菌或支原体的污染都可能迅速杀死培养的细胞。
营养大餐(培养基):这是细胞的“食物”。通常由基础培养基(如DMEM、RPMI-1640)加上血清(通常为胎牛血清,提供生长因子)组成。
模拟体内环境:
温度:哺乳动物细胞通常在 37°C(人体体温)下培养。
气体:需要 5%的二氧化碳 来维持培养液的pH值,以及氧气供细胞代谢。
公司正在出售的产品:
| 台桌清洁剂(饭桌、工作台、学生课桌椅等) |
跨膜丝氨酸蛋白酶13抗体 |
| 细胞单胺氧化酶(MAO)总活性荧光定量检测试剂盒 |
TRIM62蛋白抗体 |
| 组织PAR1Bα激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) |
G蛋白偶联受体GPR91蛋白抗体 |
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酸性核糖体磷蛋白P2抗体 |
| 体液VZV(VARICELLA ZOSTER)病毒定性检测试剂盒 |
E3泛素蛋白连接酶dzip3抗体 |
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组蛋白H3-K36乙酰化检测试剂盒 |
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NF KAPPA B P65蛋白表达ELISA定量检测试剂盒 |
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细胞CASPASE-3蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒 |
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小鼠DC细胞植物组织DNA损伤彗星完全荧光检测试剂盒 |
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?10毫升玻璃匀浆器 |
| 6号染色体开放阅读框138抗体 |
丝裂原活化蛋白激酶p38α单克隆抗体 |
细胞分选与检测(流式细胞术):
核心原理:
利用荧光标记的抗体去“识别”细胞表面的特定抗原。细胞在液体中单个排列,通过激光束时,仪器会根据荧光信号将细胞分到不同的收集管中。
关键步骤:
制备单细胞悬液:必须把组织打散成单个细胞。
抗体标记:给细胞“穿上”荧光抗体。
上机调试:调节电压和补偿,确保信号准确。
应用: 检测细胞周期、细胞凋亡、细胞表面标志物分析等。