
1)组织来源于实验动物兔的正常胃组织。
2)细胞鉴定:纤维连接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:长梭形细胞,不规则细胞,贴壁培养。
我们推荐使用 DELF 原代成纤维细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
细胞传代:

传代前的准备与判断
在动手之前,你需要判断细胞是否到了该传代的时候。
观察时机:通常在显微镜下观察,当贴壁细胞的融合度达到 80% - 90% 时(即细胞覆盖了培养瓶底面积的80%-90%)是最佳传代时机。
过早或过晚的后果:
太早:细胞数量少,资源浪费。
太晚:细胞进入平台期,生长停滞,甚至因接触抑制或营养缺乏而状态变差。
试剂预热:将PBS、胰蛋白酶(Trypsin)和完全培养基在37℃水浴中预热。
关键注意事项:

把握传代时机:
最佳时期是对数生长期。如果你看到培养基颜色由红变黄(酚红指示剂),说明细胞代谢旺盛,酸性产物堆积,这时候通常就需要传代或换液了。
胰酶消化要精准:
不是浓度越高越好,也不是时间越长越好。消化过度会损伤细胞膜,导致细胞很难贴壁或死亡。一旦细胞变圆,应立即终止反应。
无菌操作是底线:
所有操作必须在超净台内进行,喷洒酒精消毒,点燃酒精灯形成无菌区域。
减少气泡:
吹打细胞时动作要轻柔,尽量避免产生气泡。气泡破裂的瞬间张力可能会损伤细胞。
细胞计数:
如果是重要的实验或原代细胞,建议使用细胞计数板进行计数,以保证接种密度的一致性;如果是生长稳定的细胞系,可以根据经验按比例分瓶。
公司正在出售的产品:
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狂犬病病毒糖蛋白抗体 |
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Arf1鸟苷酸酶活性分析试剂盒 |
| 6号染色体开放阅读框186抗体 |
突触相关蛋白25重组鼠单克隆抗体 |
细胞培养的核心原理与环境控制:
培养基组成
基础营养:含葡萄糖、氨基酸、维生素及无机盐(如DMEM、RPMI-1640培养基)。
血清添加:胎牛血清(FBS)提供生长因子与贴壁因子(常用浓度5%-20%)。
pH与气体环境:
维持pH 7.2-7.4(HEPES缓冲液或CO?培养箱)。
5% CO?平衡碳酸氢盐系统,模拟生理条件。
无菌操作体系
超净工作台紫外消毒+75%乙醇擦拭,培养箱定期甲醛熏蒸。
抗生素添加(如青链霉素)预防细菌污染。