什么是 活化凝血因子Ⅻ (FⅫa)?
全称:活化凝血因子Ⅻ(Factor XIIa, Hageman factor a)。
本质:一种由620个氨基酸组成的单链糖蛋白酶,属于丝氨酸蛋白酶家族。
活化机制:
接触活化:当血管内皮受损,因子Ⅻ接触到带负电荷的表面(如胶原、脂蛋白、细菌脂多糖、硅藻土等)时,会裂解为具有酶活性的双链形式,即FⅫa。
| 产品名称 |
人活化凝血因子Ⅻ(FⅫa)ELISA试剂盒 |
英文名称 |
FⅫa ELISA Kit |
| 规格 |
48T/96T |
货号 |
Y-E2826 |
| 保存 |
2-8℃ |
用途 |
仅供科研 |
主要功能:

启动内源性凝血:激活因子XI,进而启动内源性凝血级联反应。
激肽释放酶-激肽系统:激活血浆激肽释放酶(PK),参与缓激肽的生成,调节血管通透性和血压。
纤溶系统:激活纤溶酶原,促进纤维蛋白溶解。
炎症反应:FⅫa是连接凝血、炎症和补体系统的桥梁。
研究意义:
血栓性疾病:FⅫa水平升高与深静脉血栓、肺栓塞、弥散性血管内凝血(DIC)等疾病相关。
抗凝药物研发:由于缺乏FⅫa不会导致出血倾向,它被认为是开发新型抗凝药物的理想靶点(既能抗栓又不引起出血)。
试剂盒核心介绍

该试剂盒通常采用双抗体夹心法(Sandwich ELISA)原理。
检测原理:
包被:微孔板上预包被了抗人FⅫa的特异性单克隆抗体(捕获抗体)。
结合:加入标准品或待测血浆样本,样本中的FⅫa与包被抗体结合。
检测:加入酶标(通常为HRP辣根过氧化物酶)的检测抗体(多克隆抗体),形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。
显色:加入底物TMB,酶催化底物显色(蓝色),最后加入终止液(通常为硫酸),颜色变为黄色。
计算:颜色的深浅与样本中FⅫa的浓度成正比。使用酶标仪在450nm波长处测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品浓度。
详细性能与规格

检测方法双抗体夹心法 ELISA
检测范围视具体品牌而定(通常为 0.156 - 10 ng/mL 或 1.25 - 80 U/L)
灵敏度最低检测限通常 0.1 ng/mL
样本类型血浆(首选)、血清(较少用,因凝血过程复杂)
检测时间约 2.5 - 3 小时
保存条件2-8℃冷藏保存,切勿冷冻
有效期6 个月
适用样本处理要点

由于凝血因子极易受外界因素激活或降解,样本采集与处理是实验成功的关键:
抗凝剂选择:
首选枸橼酸钠:采集血液时,必须使用0.109M 枸橼酸钠抗凝(通常为9:1比例),以螯合钙离子阻止凝血 cascade。
避免肝素:肝素可能会干扰某些酶联免疫反应,除非试剂盒说明书明确说明适用肝素抗凝。
离心分离:
采集后应立即轻轻颠倒混匀。
在4℃条件下,以 2000-3000×g 离心 15-20 分钟,分离血浆。
小心吸取上清(血浆),避免吸取白细胞层(“灰白层”)。
保存:
若不立即检测,建议分装后保存于 -80℃。
严禁反复冻融,因为冻融会激活凝血因子或导致蛋白降解。
激活预防:
操作过程应尽量轻柔,避免剧烈震荡,防止体外接触激活。
关键操作注意事项

试剂平衡:试剂盒从冰箱(2-8℃)取出后,必须在室温下平衡 15-30 分钟。
洗涤液结晶:浓缩洗涤液在低温下可能会有结晶析出。使用前可在 37℃ 水浴中加热溶解,再用蒸馏水稀释。
洗板:洗板必须彻底,防止残留物导致非特异性吸附。
临床解读:
区分FⅫ与FⅫa:普通凝血因子Ⅻ(抗原)检测反映的是总量,而FⅫa检测反映的是活化状态。两者意义不同,需根据实验目的选择试剂盒。