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人谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)ELISA试剂盒

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销售商：上海研生实业有限公司

产品概述：

GSH-Px是体内重要的含硒抗氧化酶，广泛存在于细胞质和线粒体中。它能催化谷胱甘肽（GSH）氧化为氧化型谷胱甘肽（GSSG），从而清除体内的过氧化氢和脂质过氧化物，保护细胞膜结构和功能免受氧化损伤。该指标与衰老、肿瘤、心血管疾病及炎症反应密切相关。

为了帮助你更好地开展氧化应激或病理机制相关的研究，我为你整理了该试剂盒的详细介绍：

试剂盒核心原理

市面上的人GSH-Px ELISA试剂盒主要采用双抗体夹心法（Sandwich ELISA）。

原理：利用纯化的抗-GSH-Px抗体预先包被在96孔微孔板上。当加入待测样本（如血清、组织匀浆、细胞裂解液等）时，样本中的GSH-Px会与固相抗体结合。随后加入HRP（辣根过氧化物酶）标记的检测抗体，形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”的夹心复合物。

显色：加入TMB（四甲基联苯胺）底物液后，HRP催化底物显色，颜色由无色变为蓝色，并在加入终止液（通常为硫酸）后变为黄色。

检测：颜色的深浅与样本中GSH-Px的浓度呈正相关。使用酶标仪在450nm波长处测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算出样本中GSH-Px的精确浓度。

典型性能参数参考

参数项典型数值/描述

检测范围视具体品牌而定（如 0.312 - 20 ng/mL）

灵敏度0.1 ng/mL

样本类型血清、血浆（EDTA/肝素）、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清等

检测时间约 2 - 3 小时

保存条件2-8℃ (避光保存)

有效期6个月

主要应用领域

GSH-Px的检测在以下科研领域具有重要价值：

氧化应激研究：评估机体或细胞在受到外界刺激（如辐射、毒素、药物）时的抗氧化能力。GSH-Px活性降低通常提示氧化应激水平升高。

衰老与老年病：研究衰老过程中机体抗氧化功能的衰退，以及其与老年痴呆、帕金森病等神经退行性疾病的关系。

肿瘤研究：探索肿瘤细胞如何通过调节GSH-Px水平来抵抗化疗药物诱导的氧化损伤（耐药机制）。

营养学研究：辅助研究微量元素（特别是硒）缺乏或补充对机体抗氧化酶活性的影响。

操作关键与注意事项

为了确保实验数据的准确性和重复性，建议你重点关注以下几个操作细节：

样本处理（至关重要）：

避免溶血：红细胞中含有丰富的GSH-Px，因此溶血会严重干扰血清或血浆样本的测定结果，请务必规范采血和分离过程。

组织/细胞样本：建议在匀浆或裂解缓冲液中加入蛋白酶抑制剂，并在冰浴条件下操作，以防止蛋白降解。

保存：样本如需长期保存，应置于-20℃或-80℃，严禁反复冻融。

试剂准备与平衡：

平衡：试剂盒从冷藏环境（2-8℃）取出后，需在室温（20-25℃）平衡15-30分钟后再打开密封袋，防止冷凝水影响反应体积和浓度。

洗涤液：浓缩洗涤液在低温下可能会有结晶析出，使用前可在37℃水浴中温育溶解。

实验操作细节：

洗板：这是关键步骤。建议洗板5次，每次注满孔，静置1分钟后甩尽液体，并在吸水纸上拍干。

温育：严格控制温育时间和温度（通常为37℃），温育过程中建议使用封板膜密封，防止液体蒸发。

读数：加入终止液后，应在15分钟内完成读数，防止颜色变化影响准确性。

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