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人高分子量细胞角蛋白(CK-HMW)ELISA试剂盒

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销售商：上海研生实业有限公司

产品概述：

高分子量细胞角蛋白（High Molecular Weight Cytokeratin, CK-HMW）是细胞角蛋白家族中的一类，主要表达于复层鳞状上皮和某些导管上皮细胞中。在病理学和肿瘤学研究中，CK-HMW 是鉴别鳞状细胞癌、尿路上皮癌以及区分腺癌（通常阴性）的重要标志物。

这类 ELISA 试剂盒主要用于科研领域，定量检测人血清、血浆、细胞培养上清或组织匀浆中的 CK-HMW 含量。

以下是根据现有资料为你整理的核心信息：

1. 试剂盒检测原理

该试剂盒采用双抗体夹心法（Sandwich ELISA）。

原理简述：利用纯化的抗人 CK-HMW 抗体预先包被在微孔板上。向孔中加入待测样本，样本中的 CK-HMW 与固相抗体结合。洗涤后，加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体，形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”复合物。

显色反应：加入底物 TMB 后，HRP 酶催化 TMB 显色（蓝色），在酸性终止液（通常为硫酸）作用下最终变为黄色。

定量分析：颜色的深浅与样本中 CK-HMW 的浓度呈正相关。使用酶标仪在 450nm 波长处测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算出样本中 CK-HMW 的具体浓度。

2. 基本参数与规格

项目详细说明

常见规格48T (48孔) / 96T (96孔)

检测样本血清、血浆（EDTA/肝素抗凝）、细胞培养上清、组织匀浆、尿液等

检测时间约 2-3 小时

保存条件2-8℃ 冷藏保存，切勿冷冻

有效期通常为 6 个月

主要应用仅用于科学研究，不得用于临床诊断

主要组成成分：

微孔酶标板：已包被捕获抗体的 96 孔或 48 孔板（可拆卸条状）。

标准品：冻干粉或溶液，用于绘制标准曲线。

酶标试剂：HRP 标记的检测抗体。

缓冲液：样本稀释液、浓缩洗涤液（需稀释后使用）。

显色与终止液：显色剂 A 液、B 液，以及终止液。

3. 样本收集与处理要求

为了保证检测结果的准确性，样本处理需遵循以下规范：

血清：使用不含热原和内毒素的试管收集血液，室温静置 2 小时或 4℃ 过夜，使血液凝固。然后以 3000 转/分离心 10-20 分钟，取上清检测。如不立即检测，可分装冻存于 -20℃（避免反复冻融）。

血浆：使用 EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂采集血液，采集后 30 分钟内以 3000 转/分离心 15-30 分钟，取上清检测。

组织匀浆：将组织块用预冷的 PBS（0.01M, pH=7.4）冲洗去除血液，称重后按 1:9 的重量体积比加入匀浆介质，在冰上充分研磨或超声破碎。然后以 3000-5000 转/分离心 10-20 分钟，取上清检测。

细胞上清：收集细胞培养上清，以 3000 转/分离心 10-20 分钟，除去细胞碎片及杂质，取上清检测。

4. 关键注意事项

避免溶血：溶血标本会释放内源性 HRP，干扰显色结果，因此不建议使用溶血严重的样本。

试剂平衡：试剂盒从冷藏环境（2-8℃）取出后，需在室温（20-25℃）平衡 15-60 分钟后再进行操作。

洗涤彻底：洗板是关键步骤，必须彻底洗涤以降低背景噪音，防止非特异性结合。

标准曲线：每次实验都应重新绘制标准曲线，以确保定量的准确性。

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