什么是 MCT?
全称:人肥大细胞类胰蛋白酶(Human Mast Cell Tryptase)。
来源:主要由肥大细胞合成并储存在分泌颗粒中。
功能:它是一种丝氨酸蛋白酶,在过敏反应、寄生虫感染、组织重塑及炎症反应中起重要作用。
| 产品名称 |
人肥大细胞类胰蛋白酶(MCT)ELISA试剂盒 |
英文名称 |
MCT Elisa Kit |
| 规格 |
48T/96T |
货号 |
Y-E3065 |
| 保存 |
2-8℃ |
用途 |
仅供科研 |
临床/科研意义:由于其在血液中半衰期较长(约2小时),且特异性高,常用于辅助诊断过敏性休克、评估肥大细胞活化程度以及研究哮喘等过敏性疾病的病理机制。
试剂盒核心介绍

该试剂盒通常采用双抗体夹心法(Sandwich ELISA)原理。
检测原理:
捕获:微孔板上预包被了抗人MCT的特异性单克隆抗体。
结合:加入标准品或待测样本后,样本中的MCT会与包被抗体结合。
检测:加入酶标(通常为HRP)的检测抗体,形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。
显色:加入底物TMB,酶催化底物显色(蓝色),最后加入终止液(通常为硫酸),颜色变为黄色。
计算:颜色的深浅与样本中MCT的浓度成正比。使用酶标仪在450nm波长处测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算出样本浓度。
详细性能与规格

检测方法双抗体夹心法 ELISA
检测范围通常为 1.56 ng/mL - 100 ng/mL
灵敏度最低检测限通常 0.78 ng/mL (具体视品牌而定)
样本类型血清、血浆(EDTA/肝素抗凝)、细胞培养上清、组织匀浆
检测时间约 2 - 4 小时
保存条件2-8℃冷藏保存,切勿冷冻
有效期6 个月
适用样本处理要点

为了保证数据的准确性,样本处理非常关键:
血清:
使用不含热原和内毒素的试管收集血液。
室温静置 2 小时或 4℃ 过夜,然后以 1000×g 离心 20 分钟,取上清检测。
血浆:
需使用抗凝剂(EDTA、柠檬酸盐或肝素)。
离心后取上清。
注意:某些抗凝剂可能会影响检测,建议根据说明书选择。
组织/细胞:
组织匀浆:用预冷的PBS冲洗组织,称重后剪碎,按1:9比例加入PBS进行研磨,再离心取上清。
细胞上清:离心去除细胞碎片后取上清。
保存:
若不立即检测,建议分装后保存于 -20℃。
严禁反复冻融,以免蛋白降解。
关键操作注意事项

试剂平衡:试剂盒从冰箱(2-8℃)取出后,必须在室温下平衡 15-30 分钟后再使用,否则会影响温育效果。
洗涤液结晶:浓缩洗涤液在低温下可能会有结晶析出,属于正常现象。使用前可在 37℃ 水浴中加热溶解,再用蒸馏水稀释(通常1:20)。
洗板:洗板必须彻底,防止残留物导致非特异性吸附。手工洗板时,每孔加满洗涤液,静置 1 分钟后甩尽,并在吸水纸上拍干,通常需重复 5 次。
显色:底物TMB应为无色,若变蓝则已失效;终止液为强酸,操作需小心。
结果解读参考
正常值范围:一般认为正常人血清MCT浓度小于 5 ng/mL。
异常升高:通常大于 10 ng/mL 被视为异常升高,提示可能存在肥大细胞活化或过敏反应。