"刀豆素A(Concanavalin A, ConA)是一种从刀豆中提取的植物血凝素,常用于诱导T淋巴细胞增殖,是免疫学研究中常用的刺激剂。以下是基于现有资料为您整理的详细介绍:
该试剂盒通常采用双抗体夹心法(Sandwich ELISA)原理。
包被:用纯化的抗人刀豆素A抗体预包被在微孔板上。
孵育:向微孔中加入待测样本(或标准品)以及酶标二抗(HRP标记的检测抗体)。
结合:样本中的刀豆素A与固相抗体和酶标抗体结合,形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”复合物。
显色:洗去未结合的物质后,加入底物TMB。TMB在辣根过氧化物酶(HRP)的催化下转化为蓝色,并在酸的作用下转化为最终的黄色。
测定:颜色的深浅与样本中刀豆素A的浓度呈正相关。使用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算出样本中刀豆素A的具体浓度。
常见产品参数参考.
参数 详细说明
检测范围 视品牌而定(例如:0.156-10 ng/mL 或 0.312-20 ng/mL)。
灵敏度 最低检测限通常小于 0.078 ng/mL。
样本类型 血清、血浆(EDTA/肝素抗凝)、组织匀浆、细胞上清、尿液等。
有效期 通常为 6个月。
保存条件 2-8℃冷藏保存。
样本收集与处理.
为了保证实验结果的准确性,请注意以下样本处理要求:
血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心(2000-3000转/分)20分钟,取上清。如有沉淀,应再次离心。
血浆:使用EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心取上清。
组织匀浆:称取组织重量,加入适量生理盐水或PBS(pH 7.4)进行捣碎或匀浆,离心后取上清。
细胞上清:离心除去颗粒和聚合物。
保存:若不能立即检测,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
注意事项与禁忌.
试剂平衡:试剂盒从冰箱取出后,应在室温平衡15-30分钟后再使用。
洗涤液结晶:浓缩洗涤液在低温保存时可能会有结晶析出,稀释前需在水浴中温热使其溶解,这属于正常现象,不影响使用。
安全:操作时应避免试剂和标本的交叉污染,终止液含酸,避免接触皮肤。"