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人蛋白激酶A(PKA)ELISA试剂盒

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销售商：上海研生实业有限公司

产品概述：

"蛋白激酶A（PKA）是细胞内cAMP信号通路的关键效应分子，参与调节糖原、糖和脂质代谢以及基因表达。以下是基于现有资料为您整理的详细介绍：

试剂盒基本原理.

该试剂盒通常采用双抗体夹心法（Sandwich ELISA）原理。

包被：用纯化的抗人PKA抗体包被微孔板，制成固相抗体。

结合：向微孔中加入待测样本（或标准品），样本中的PKA与固相抗体结合。

酶标：加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体，与结合在固相上的PKA结合，形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”夹心复合物。

显色：洗去未结合的物质后，加入底物TMB。TMB在HRP的催化下转化为蓝色，并在酸性终止液作用下变为黄色。

测定：颜色的深浅与样本中PKA的浓度呈正相关。使用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算出样本中PKA的具体浓度。

常见产品参数参考.

参数详细说明

检测范围视品牌而定（例如：0.156-10 ng/mL 或 125-4000 pg/mL）。

灵敏度最低检测限通常小于 0.074 ng/mL 或 10 pg/mL。

样本类型血清、血浆（EDTA/肝素抗凝）、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清等。

有效期通常为 6个月。

保存条件 2-8℃冷藏保存，切勿冷冻。

样本收集与处理.

为了保证实验结果的准确性，请注意以下样本处理要求：

血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心（2000-3000转/分）20分钟，取上清。如有沉淀，应再次离心。

血浆：使用EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心取上清。

组织匀浆：称取组织重量，加入适量生理盐水或PBS（pH 7.4）进行研磨或超声破碎，离心后取上清。

细胞上清：离心除去颗粒和聚合物。

保存：若不能立即检测，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

注意事项与禁忌.

试剂平衡：试剂盒从冰箱取出后，应在室温平衡15-30分钟后再使用。

洗涤液结晶：浓缩洗涤液在低温保存时可能会有结晶析出，稀释前需在水浴中温热使其溶解，这属于正常现象，不影响使用。

安全：操作时应避免试剂和标本的交叉污染，终止液含酸，避免接触皮肤。

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