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| 销售商： 上海谷研实业有限公司 | 查看该公司所有产品 >> |
| 英文简称 | PA Elisa Kit | 货号 | GOY-1442E |
| 规格 | 96T/48T | 种属 | 人 |
| 保存 | 2-8℃避光保存 | 用途 | 仅供科研研究 |
检测方法： 双抗体夹心酶联免疫吸附法 (Sandwich ELISA)
适用样本： 人血清、血浆 (肝素/EDTA/柠檬酸盐抗凝)、细胞培养上清液、其他生物体液
预期用途： 定量检测人样本中的前白蛋白 (PA) 含量。用于营养评估、肝功能监测、炎症状态分析等。
检测原理
采用双抗体夹心法原理：
捕获抗体： 预包被在人PA特异性单克隆抗体于酶标板孔内。
抗原结合： 样本/标准品中的PA与捕获抗体结合。
检测抗体： 加入生物素标记的人PA特异性抗体，形成抗体-PA-抗体复合物。
酶结合： 加入链霉亲和素-辣根过氧化物酶（Streptavidin-HRP）。
显色： 加入底物TMB显色液，在HRP催化下产生蓝色产物。
终止与测定： 加入终止液变黄色，用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），样本OD值与PA浓度呈正比。
试剂盒组分
| 组分 | 规格 | 保存条件 |
| 预包被微孔板 | 96孔（12条×8孔） | 2-8℃ |
| 人PA标准品 | 0.5mL/管 × 6管（浓度梯度） | -20℃ |
| 生物素标记检测抗体 | 1瓶 | -20℃ |
| Streptavidin-HRP | 1瓶 | -20℃ |
| 样本稀释液 | 1瓶 | 2-8℃ |
| 洗涤液（20X浓缩） | 1瓶 | 2-8℃（稀释后2-8℃） |
| TMB显色液 | 1瓶 | 2-8℃（避光） |
| 终止液 | 1瓶 | 2-8℃ |
| 封板膜 | 4张 | 室温 |
| 说明书 | 1份 | - |
样本要求
血清/血浆： 采集后离心去除颗粒，避免溶血或脂血。2-8℃保存≤7天，长期保存需-20℃或更低，避免反复冻融。
稀释： 多数样本需按说明书比例稀释（例：1:10000）后检测。
操作步骤
准备工作
将试剂平衡至室温（20-25℃），浓缩洗涤液按1:19稀释成工作液。
加样
分别加入标准品、质控品、稀释样本各100μL至对应孔，空白孔加100μL稀释液，覆膜孵育（37℃, 60分钟）。
洗板
弃液后每孔加350μL洗涤液浸泡30秒，重复洗板5次，拍干。
加检测抗体
每孔加100μL生物素化抗体（37℃, 60分钟），洗板5次。
加酶结合物
每孔加100μL Streptavidin-HRP（37℃, 30分钟，避光），洗板5次。
显色
每孔加90μL TMB显色液（37℃, 10-20分钟避光）。
终止与读数
每孔加50μL终止液变黄色，5分钟内用酶标仪在450nm测OD值（建议设置550nm或630nm双波长校正）。
结果计算
计算各标准品平均OD值（减去空白值）。
以标准品浓度（X）为横坐标，OD值（Y）为纵坐标拟合标准曲线（推荐使用四参数或对数坐标）。
根据样本OD值从标准曲线查出对应浓度，乘以稀释倍数即得实际浓度（μg/mL或mg/L）。
技术参数
| 项目 | 性能 |
| 检测范围 | 0.312 - 20 mg/L |
| 灵敏度 | ≤0.156 mg/L |
| 精密度 | 批内变异系数（CV）<10%，批间CV<15% |
| 特异性 | 与人白蛋白、转铁蛋白等无交叉反应 |
| 回收率 | 85% - 115% |
注意事项
关键操作提醒
标准品需精确配制并遵守顺序加样。
严格控制各步骤温育时间和温度。
洗板务必彻底，避免残留导致假阳性。
TMB显色反应时间需优化，过久可能饱和。
终止后30分钟内完成读数。
使用一次性吸头，避免交叉污染。
接触终止液（含酸）需戴手套操作。
公司正在出售的产品
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