产品基本信息
适用样本:血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等
检测方法:酶联免疫夹心法(ELISA)
种属适用性:人、大鼠、小鼠、牛、鸡、马、兔、猪、犬、猴、羊、鱼等
保存条件:2-8°C保存,有效期6个月
| 英文简称 |
MV IgM Elisa Kit |
货号 |
GOY-0611E |
| 规格 |
96T/48T |
种属 |
人 |
| 保存 |
2-8℃避光保存 |
用途 |
仅供科研研究 |
操作步骤
1. 试剂盒准备:
从4℃冰箱取出试剂盒,室温平衡15-30分钟(浓缩洗涤液需水浴加热溶解结晶);
稀释浓缩洗涤液(如1:30),备用。
2. 加样:
标准品孔:加入不同浓度的标准品(如50μL/孔),绘制标准曲线;
样本孔:加入稀释后的待检样本(如50μL/孔);
空白孔:加入等量样本稀释液(不加标准品/样本)。
3. 孵育与结合:
加入酶标试剂(如100μL/孔,空白孔除外);
用封板膜密封微孔板,37℃恒温箱孵育60分钟(或按说明书要求调整时间)。
4. 洗涤:
弃去孔内液体,每孔加入稀释后的洗涤液(350μL/孔),静置1分钟,甩去洗涤液,吸水纸拍干;
重复洗涤5次(或用洗板机洗板)。
5. 显色:
每孔加入显色剂A(50μL)和显色剂B(50μL),轻轻混匀;
37℃避光孵育15分钟(或观察颜色变化,避免过度显色)。
6. 终止与读数:
每孔加入终止液(50μL),此时蓝色转为黄色;
15分钟内用酶标仪在450nm波长读取各孔OD值(空白孔调零)。
注意事项
试剂平衡:从冷藏环境取出后,需室温平衡15-30分钟再使用。开封后的酶标板条应密封保存。
加样规范:
使用校准的加样器,避免加样误差(尤其阈值附近样本)。
建议单次加样时间控制在5分钟内,大批量样本推荐使用排枪。
洗涤液处理:浓洗涤液可能出现结晶,可水浴加温助溶,不影响检测结果。
标准曲线:每次检测需同步制作标准曲线,建议做复孔。若样本OD值超出标准曲线范围,需稀释后重新测定。
交叉污染防控:
封板膜仅限一次性使用。
不同批号试剂组分不得混用。
底物保存:避光保存,避免失效。
结果判定:严格依据酶标仪读数,人工判读易引入误差。
样本处理要求
血液样本:
血清:全血静置1-2小时后离心分离。
血浆:抗凝全血颠倒混匀后离心,根据实验需求选择抗凝剂(如肝素、EDTA)。
其他液体样本:离心去除颗粒物后取上清检测。
安全与废弃物处理
所有样本、洗涤液及废弃物均需按生物传染物规范处理,避免环境污染。
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