产品概述
本试剂盒采用双抗原一步夹心法或双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA),用于检测人血清、血浆或细胞上清液中的轮状病毒抗原(RV-Ag)。适用于科研用途,不可用于临床诊断。
| 英文简称 |
RV Ag Elisa Kit |
货号 |
GOY-0581E |
| 规格 |
96T/48T |
种属 |
人 |
| 保存 |
2-8℃避光保存 |
用途 |
仅供科研研究 |
检测原理
双抗原夹心法:预包被轮状病毒抗体的微孔板中依次加入样本、HRP标记检测抗原,经温育洗涤后,TMB显色,450nm波长下测定OD值,与阈值(CUTOFF)比较判定结果。
双抗体夹心法:包被捕获抗体捕获样本中抗原后,加入HRP标记二抗形成复合物,TMB显色后通过标准曲线定量抗原浓度。
试剂盒组成
预包被酶标板
校准品(梯度浓度)
HRP标记检测抗体/抗原
通用稀释液(20×)
浓缩洗液(20×)
TMB显色剂
终止液(稀硫酸)
样本要求
血清:无菌采集后3000rpm离心10分钟,避免溶血。
血浆:EDTA/柠檬酸盐/肝素抗凝,3000rpm离心30分钟取上清。
细胞上清:3000rpm离心10分钟去除颗粒。
保存:2-8℃短期保存,-20℃长期避免反复冻融。
操作步骤
平衡:试剂室温平衡20-30分钟,酶标板恢复至室温后开封。
加样:
标准品孔:加入梯度浓度校准品50-100μL。
样本孔:加入50μL样本(或80μL稀释液+20μL样本)。
空白孔:不加样。
温育:37℃孵育60分钟,洗涤3-5次(每次拍干残液)。
加酶:每孔加入HRP标记抗体100μL,37℃孵育60分钟。
显色:加入TMB 100μL避光显色15分钟。
终止:加入50μL终止液。
检测:酶标仪450nm(参比波长620-690nm)读取OD值。
结果判读
定性:样本OD值≥CUTOFF为阳性。
定量:根据标准曲线计算浓度。
注意事项
试剂运输需2-8℃低温,避免反复冻融。
不同批号组分不可混用。
终止液为腐蚀性液体,需谨慎操作。
实验废弃物需按生物危害处理。
有效期与储存
未开封试剂盒:2-8℃保存6个月。
开封后:酶标板密封后4℃保存1个月内使用。
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