该试剂盒主要用于科研领域,定量检测人血清、血浆、细胞培养上清液或组织匀浆中 表皮生长因子 (Epidermal Growth Factor, EGF) 的含量。EGF 是一种重要的多肽类生长因子,在细胞增殖、分化、组织修复及肿瘤发生发展中起关键调控作用。
| 产品名称 |
人表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒 |
英文名称 |
EGF Elisa Kit |
| 规格 |
48T/96T |
货号 |
Y-E082 |
| 保存 |
2-8℃ |
用途 |
仅供科研 |
1. 试剂盒基本原理

本试剂盒通常采用双抗体夹心法 (Sandwich ELISA)。
原理:利用纯化的人EGF特异性抗体(捕获抗体)预包被在微孔板上,捕获样本中的EGF。随后加入酶标(通常为HRP辣根过氧化物酶)的检测抗体,形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”免疫复合物。
显色反应:加入底物TMB后,HRP催化TMB产生蓝色显色反应,在酸性终止液作用下变为黄色。
定量:颜色的深浅与样本中EGF的浓度呈正相关。使用酶标仪在450nm波长处测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算出样本中EGF的具体浓度。
2. 主要组成成分

试剂盒(以96孔板为例)通常包含以下组分:
组分名称 说明
酶标包被板 96孔,预包被抗人EGF抗体,2-8℃保存
标准品 重组或天然人EGF,用于绘制标准曲线
酶标试剂 HRP标记的抗人EGF抗体
样本稀释液 用于稀释待测样本
浓缩洗涤液 通常为20×或30×浓缩液,使用前需用蒸馏水稀释
显色剂 (TMB) 避光保存,A液和B液通常需分别加入
终止液 通常为2M硫酸,具有腐蚀性,用于终止反应
封板膜 用于反应过程中的密封
3. 适用样本类型

血清/血浆:用于检测循环系统中EGF的水平,反映全身性代谢或病理状态。
细胞培养上清:用于检测体外培养的细胞(如肿瘤细胞、成纤维细胞)分泌的EGF。
组织匀浆:用于检测组织(如皮肤、胃肠道黏膜、肿瘤组织)中EGF的表达水平。
体液:如唾液、尿液或脑脊液(需根据具体试剂盒验证)。
注意事项:样本若不立即检测,建议分装后于-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
4. 产品特点

高灵敏度:灵敏度通常可达 15.6 pg/mL 或更低,能准确检测样本中微量的EGF。
高特异性:与人TGF-α(转化生长因子α)、HB-EGF(肝素结合EGF)等其他EGF家族成员无明显交叉反应。
重复性好:板内和板间变异系数(CV)通常小于10%,数据稳定可靠。
应用广泛:广泛用于肿瘤学、皮肤科学、创伤修复及消化系统疾病的研究。
5. 操作步骤概览

准备:试剂平衡至室温(15-30分钟),配制洗涤液。
加样:设置标准品孔和样本孔,加入相应液体(通常50μl-100μl/孔)。
温育:37℃恒温箱温育(通常60分钟)。
洗涤:弃去孔内液体,洗涤液注满每孔,静置后弃去,重复5次,拍干。
加酶标试剂:每孔加入酶标工作液,37℃温育30-60分钟,再次洗涤。
显色:每孔加入TMB底物溶液,37℃避光显色15-30分钟。
终止:每孔加入终止液,溶液颜色由蓝变黄。
读数:在450nm波长处测定各孔的OD值(建议在加终止液后15分钟内完成)。