产品用途
本试剂盒采用酶联免疫吸附试验(ELISA) 原理,定性或定量检测人血清或血浆中脊髓灰质炎病毒(Poliovirus)特异性IgG抗体。适用于:
评估个体对脊髓灰质炎的免疫保护状态(如疫苗接种后抗体水平)
流行病学调查研究
免疫缺陷患者的免疫力评估
| 英文简称 |
PV-IgG Elisa Kit |
货号 |
GOY-0568E |
| 规格 |
96T/48T |
种属 |
人 |
| 保存 |
2-8℃避光保存 |
用途 |
仅供科研研究 |
检测原理
固相抗原包被:微孔板预包被灭活的脊髓灰质炎病毒抗原。
样本孵育:样本中PV-IgG与抗原结合形成复合物。
酶标二抗孵育:加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗人IgG抗体,与复合物结合。
显色反应:加入TMB底物,HRP催化显色(蓝色→黄色)。
终止与读数:加入终止液(硫酸)后颜色变黄,在450nm波长下测定吸光度(OD值),OD值与PV-IgG浓度正相关。
试剂盒组成
| 组分 | 规格(96T) | 储存条件 |
| 预包被抗原微孔板 | 8孔×12条 | 2-8°C |
| 样品稀释液 | 20mL | 2-8°C |
| PV-IgG阳性对照 | 1.0mL | -20°C |
| PV-IgG阴性对照 | 1.0mL | -20°C |
| HRP标记抗人IgG抗体 | 12mL | 2-8°C(避光)|
| TMB显色底物A/B液 | 各10mL | 2-8°C(避光)|
| 终止液(2M H₂SO₄) | 10mL | 室温 |
| 洗涤液(20×浓缩液) | 50mL | 室温(用前稀释)|
样本要求
样本类型:人血清、血浆(EDTA/肝素抗凝)。
处理建议:
离心分离血清/血浆,避免溶血、脂血或污染。
短期储存于2-8°C(≤7天),长期储存于**-20°C以下**(避免反复冻融)。
稀释比例:通常按1:101稀释(如5μL样本+500μL稀释液)。
操作步骤
平衡:将所有组分恢复至室温(约30分钟)。
加样:
孔位设置:空白孔、阴性对照孔、阳性对照孔、样本孔。
每孔加入100μL稀释样本/对照品,37°C孵育30分钟。
洗涤:弃液,用洗涤液洗板5次(每孔300μL),拍干。
加酶标二抗:每孔加100μL HRP-抗人IgG,37°C孵育30分钟。
洗涤:重复步骤3。
显色:每孔加TMB底物A+B液各50μL,避光反应15分钟(显蓝色)。
终止:每孔加50μL终止液(变黄色)。
读数:30分钟内于450nm波长下读取OD值(参考波长630nm)。
结果判定
定性分析(适用于免疫状态筛查):
Cut-off值 = (阴性对照均值 + 0.15)或(2.1×阴性对照均值)
阳性:样本OD值 ≥ Cut-off值
阴性:样本OD值 < Cut-off值
定量分析(需标准曲线):
使用试剂盒提供的校准品(如有) 绘制标准曲线(4PL拟合),计算样本中PV-IgG浓度(单位:IU/mL或AU/mL)。
注:不同单位体系可能不同,请参考配套校准品说明。
性能参数
| 指标 | 参数 |
| 灵敏度 | ≥95% |
| 特异性 | >99%(与其他肠道病毒无交叉)|
| 重复性(CV值) | 板内CV≤10%,板间CV≤15% |
| 检测范围 | 2-200 IU/mL(示例) |
| 有效期 | 12个月(2-8°C避光) |
注意事项
仅限体外诊断使用,不可用于脊髓灰质炎的急性诊断(需检测IgM或PCR)。
操作全程需戴手套,终止液为强酸,避免接触皮肤。
TMB底物需避光保存,变色立即停止使用。
需使用精度≤10μL的移液器及经过验证的洗板机。
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