Bruker推出了全新的Ultima 2P PLUS荧光计数系统多光子显微镜,该系统具有超大视野设计、卓优异的光子探测能力并且能够进行同步3D全息光刺激和探测。这一开创性设计是Bruker与神经科学领域研究者们深度合作的结果。该荧光计数系统将推进创新性研究项目,并为世界各地的前沿研究开辟新的道路。
系统亮点:
具备同级别更大的探测视野并提供优异的视野均匀性
现代光遗传学实验通常需要对样品中相距较远的不同区域进行光刺激并同时进行荧光探测。Ultima 2PPLUS将探测视野增大
为标准视野的50%以上,以满足现代光遗传学实验的需求。系统采用全新的定制化光学设计,在全域保持空间和时间分辨率,从而保证研究人员能够在不改变实验设计的情况下继续他们的研究工作。
Ultima 2PPLUS的视野数为28 mm,
与标准的18mm视野对比。
高灵敏度深层荧光探测
Ultima 2P PLUS的荧光探测光路能够确保几乎所有的从暗淡的、深层和不透明生物样品中散射的光子都能被探测到。这一优异的光子收集效率源于荧光探测光路的2英寸大口径设计和缩短的探测器光路设计。 Ultima 2P PLUS还兼容三光子荧光探测,可以对样品进行更深层的荧光探测。
使用ETL聚焦模块采集的立体堆栈3D视图。小鼠视觉皮层5B层神经元,采用tdTomato标记。比例尺100μm。图像由伦敦大学学院 Michael Häusser实验室的Lisa Bauer, Dustin Herrmann和Mehmet Fisek提供
同步3D全息光刺激和荧光探测Ultima 2PPLUS使复杂的光遗传学实验成为可能。利用计算机生成全息图,通过Neuralight3DTM空间光调制器模块进行控制,可以在多个焦平面上对大量目标同时进行光刺激。在3D全息实验中,处于不同深度的目标可通过定制设计的具有光学校正的ETL聚焦模块进行荧光探测。ETL模块可将荧光探测平面与光刺激平面沿Z轴方向分离。
3D同步光刺激和荧光探测实验示意图
荧光寿命计数(FLIM)
Ultima 2P PLUS采用多维时间相关单光子计数原理实现荧光寿命计数(FLIM),可以实现更高的时间分辨率和光子检测效率。FLIM可为您的实验增加一个新的维度,使您可以通过分析样本中的荧光团的荧光寿命变化获取细胞代谢状态、酸碱度、含氧量变化以及离子浓度变化等丰富信息。2PPLUS采用滨松的高灵敏度GaAsP探测器进行荧光寿命计数,探测器的增益由PrairieView软件控制,探测器设有过载保护,当入射光过强时可自动关闭探测器以防止损坏。

3D同步光刺激和荧光探测实验示意图

利用FLIM对肿Liu组织的代谢进行定量测量
磷光寿命计数(PLIM)
Ultima 2PPLUS的荧光寿命计数(FLIM)模块采用独特的硬件和软件设计。通过软件控制硬件开关可以使探测器的信号在常规强度探测前置放大器和荧光寿命计数前置放大器之间自由切换,避免了噪声干扰。软件支持线、点、螺旋以及徒手绘制等各种扫描模式。系统还支持记录激光激发停止后的磷光寿命计数(PLIM)。软件具有专门的PLIM扫描定义面板,可定义激光激发时间以及磷光计数周期。通过PLIM可精确测量如组织中的氧浓度等数据。
荧光寿命计数和磷光寿命计数原理示意

通过PLIM测量活ti组织中的氧浓度分布
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