奥盛推出高通量测序NGS助手Feyond-F100荧光酶标仪
浏览次数:2864 发布日期:2024-3-27
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文库的质量对于高通量测序(NGS)产出的数据质量至关重要,低估或高估文库质量都会严重影响测序的效果。目前,最常用的定量试剂,是以Picogreen为主要成分的荧光染料,当其与DNA双链结合后,才能发出荧光,且所产生的荧光在一定范围内与DNA浓度呈正比,从而起到对DNA样本的精准定量。
与这类试剂搭配最常见的仪器,应是荧光计和荧光酶标仪。常见的荧光计有Thermo的Qubit4和Qubit Flex,还有奥盛自有产品Fluo-200和Fluo-800,但荧光计的通量较少,最多只能做到8通道,若要同时进行8通道的样品检测,还需同时进行8通道的标品校准,非常浪费试剂。而选用荧光酶标仪作为检测工具时,虽然检测通量有所增大,但面临着标准曲线建立的问题,由于荧光染料受环境的影响较大,因此在每次进行样品检测时,都需要重新建立一条标准曲线,若标曲线性不够理想,还需重新配制标曲,增加实验负担。
奥盛3月份推出的Feyond-F100荧光酶标仪不仅可进行常规的细胞活性、GFP、RFP、ORAC、Ca2+流分析等荧光实验,新增的定量检测功能集荧光计的便利与酶标仪的高通量于一身,无需建立标准曲线,仅需校准标品点,即可实现96个样品的精确定量,最低检出限达0.1ng/uL(10uL样本量);该款荧光酶标仪3月22日已上市。
特色功能
除常规荧光检测外,新增定量模式
图1 Feyond-F100主界面图
仅需布局两个标品点,即可完成曲线校准
图2 标准品校准界面
内置标曲,调用即可,也可自行建立曲线保存
图3 标准曲线界面
仅需输入样品体积,检测结果一目了然
图4 结果显示界面
性能优异
标品性能验证
将10ng/uL标品梯度稀释成8、6、4、2、1、0.4、0.2ng/uL。样本量为1uL或10uL时,Feyond-F100与Q的偏差均在10%以内。
表1 标准品检测结果
体积 |
样品类型 |
Q定量 |
Feyond-F100 |
差值 |
偏差 |
10 |
标品 |
0.189 |
0.1941 |
-0.0051 |
-2.7% |
10 |
标品 |
0.378 |
0.3854 |
-0.0074 |
-2.0% |
10 |
标品 |
0.982 |
0.9739 |
0.0081 |
0.8% |
10 |
标品 |
1.93 |
1.9675 |
-0.0375 |
-1.9% |
10 |
标品 |
4 |
4.0883 |
-0.0883 |
-2.2% |
10 |
标品 |
5.94 |
6.0796 |
-0.1396 |
-2.4% |
10 |
标品 |
7.78 |
7.8077 |
-0.0277 |
-0.4% |
10 |
标品 |
10.2 |
10.0803 |
0.1197 |
1.2% |
1 |
标品 |
1.03 |
1.095 |
-0.065 |
-6.3% |
1 |
标品 |
1.92 |
1.997 |
-0.077 |
-4.0% |
1 |
标品 |
4.1 |
4.12 |
-0.02 |
-0.5% |
1 |
标品 |
6.18 |
6.043 |
0.137 |
2.2% |
1 |
标品 |
8.14 |
7.895 |
0.245 |
3.0% |
1 |
标品 |
10.5 |
10.059 |
0.441 |
4.2% |
文库及核酸定量
在测试文库样本及cfDNA样本时,Feyond-F100与Q的偏差也可在10%以内。
表2 样品检测结果
体积 |
样品类型 |
Q定量 |
Feyond-F100 |
差值 |
偏差 |
1 |
文库 |
104 |
105.079 |
-1.079 |
-1.0% |
1 |
文库 |
74.2 |
74.102 |
0.098 |
0.1% |
1 |
文库 |
77.4 |
75.628 |
1.772 |
2.3% |
1 |
文库 |
22.6 |
22.245 |
0.355 |
1.6% |
1 |
文库 |
Out of range |
148.53 |
/ |
/ |
1 |
文库 |
52.4 |
53.455 |
-1.055 |
-2.0% |
1 |
文库 |
84.6 |
87.402 |
-2.802 |
-3.3% |
1 |
文库 |
11.5 |
10.8 |
0.7 |
6.1% |
2 |
cfDNA |
0.456 |
0.482 |
-0.026 |
-5.7% |
2 |
cfDNA |
1.27 |
1.287 |
-0.017 |
-1.3% |
2 |
cfDNA |
0.625 |
0.622 |
0.003 |
0.5% |
2 |
cfDNA |
0.758 |
0.794 |
-0.036 |
-4.7% |
2 |
cfDNA |
1.45 |
1.522 |
-0.072 |
-5.0% |
2 |
cfDNA |
1.48 |
1.542 |
-0.062 |
-4.2% |
注:上述实验数据来源奥盛实验室
关于奥盛
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