AAT荧光素钾盐及酶检测、CCK-8检测试剂盒促销5折起!

 

百萤生物夏促来袭，D-荧光素钾盐及荧光素酶检测试剂盒七折出售（仅终端用户），活动时间：2020.8.1至2020.8.31。需要购买的小伙伴不要错过哦！

 

最常见的报告基因是北美萤火虫photinus pyralis的荧光素酶。该蛋白质不需要翻译后修饰即可获得酶活性。高浓度下（体内）甚至没有毒性，可用于原核和真核细胞。

 

图1.在带有NOVOstar酶标仪（BMG Labtech）的白色96孔板中，使用Amplite 萤光素酶报告基因基因检测试剂盒测量了萤光素酶剂量反应。该试剂盒可在20分钟至5小时的孵育时间内检测到低至0.1pg /孔的萤光素酶，而不会丢失信号强度。

 

Amplite 萤光素酶报告基因检测试剂盒使用无DTT配方来定量活细胞和细胞提取物中的萤光素酶活性。该检测基于萤火虫荧光素酶，萤火虫荧光素酶是一种单体的61 kD酶，可催化荧光素的两步氧化，并在560 nm处产生高度荧光。试剂盒包含所有基本成分，并具有与HTS兼容优化的“混合读取”模式。它们具有高灵敏度，可用于需要低检测限的测定。该试剂盒具有用于研究基因调控和功能的快速、简单且均一的生物发光测定法。

 

近年来，其他荧光素酶（例如高斯荧光素酶）的使用有所增加，因为这些报告基因较小，并且不需要ATP的存在。高斯荧光素酶是一种20 kD的蛋白质，可通过氧气催化腔肠素氧化，产生荧光。源自海洋co足类高斯氏菌的生物发光酶在表达后可有效地从哺乳动物细胞中分泌出来。

 

图2.用Amplite 高斯荧光素酶报告基因检测试剂盒（蓝线）和市售的高斯荧光素酶检测试剂盒（红线）在带有NOVOstar酶标仪（BMG Labtech）的白色96孔板中检测了分泌的高斯荧光素酶。

 

Amplite 高斯荧光素酶报告基因检测试剂盒使用专有的发光配方来定量细胞培养基中的荧光素酶活性。当与高斯荧光素酶相互作用时，该发光产物会产生非常强的荧光光。该试剂盒提供了与HTS兼容的所有基本组件。它们具有很高的灵敏度，可以在96孔和384孔微量滴定板上进行实验。该测定法与标准细胞生长培养基兼容。

 

海肾萤光素酶

海肾萤光素酶是一种从Renilla reniformis分离的36 kDa蛋白。与萤火虫荧光素酶相比，海肾荧光素酶的底物和辅因子要求不同。海肾荧光素酶在氧气存在下使用腔肠素，产生480 nm的蓝光。与萤火虫萤光素酶类似，海肾萤光素酶因其底物要求和光输出的差异而可用于双重报告检测。

 

图3.用Amplite Renilla荧光素酶报告基因基因检测试剂盒在白色的96孔板中用NOVOstar酶标仪（BMG Labtech）检测了Renilla荧光素酶

 

Amplite 海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒提供了一种快速，灵敏的方法，可以使用专有的发光配方在基于细胞的检测中检测海肾萤光素酶的活性。与海肾荧光素酶相互作用后，该试剂会产生具有强发光的产物。该测定法与标准细胞生长培养基兼容。该试剂盒可测量野生型和合成hRluc基因的原始表达或基因表达。可以在96孔和384孔微量滴定板形式进行实验。

 

 

 

 

百萤生物八月促销第二弹：CCK-8检测试剂盒五折出售（仅终端用户），活动时间：即日起-2020.9.30。拿起您手中的电话，快来订购吧！

 

Cell Counting Kit-8 (CCK-8)是一种基于 SST-8 的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。其主要成分为水溶性四唑盐 WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)。

 

图1.用CCK-8检测试剂盒确定细胞数。 将0至100,000个细胞/孔/ 100 µL的Jurkat细胞添加到一个透明96孔板中。使用SpectraMax酶标仪（Molecular Devices）在460nm处测量吸光度。

 

WST-8 是一种类似于 MTT 的化合物，在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的水溶性的甲臜（formazan)。WST-8 被细胞内脱氢酶生物还原后生成的甲臜能够直接溶解在培养基中。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅;颜色的深浅与细胞的增殖成正比，与细胞毒性成反比。使用酶标仪在450mM波长处测定OD值，间接反映活细胞数量。对于同样的细胞，颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。MTT 具有毒性，同时其生成的甲臜需要有机溶剂溶解，会对操作人员身体造成危害。本试剂无毒，使用中无需有机溶剂，操作更加安全。